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生物:《基因工程的基本操作程序》教案(新人教版选修3)
生物:《基因工程的基本操作程序》教案(新人教版选修3)
PAGE
生物:《基因工程的基本操作程序》教案(新人教版选修3)
基因工程的基本操作程序
教学目标
知识与技能
(1)简述基因工程的原理和技术。
(2)通过对书中插图、照片等的观察,学会科学的观察方法,培养观察能力。
(3)通过对基因工程的基本操作程序的学习,使学生在理解步骤的同时,举一反三,对于其他基因工程操作实例做到能理解、能介绍,从而培养学生对相关知识的理解能力及良好的语言表达能力。
过程与方法
通过对基本概念、基本原理的学习,引导学生主动参与教学过程的探究活动,培养学生的获取新知的能力、分析和解决问题的能力及交流与合作的能力。
情感态度和价值观
通过引导学生在网上的探究活动,引导学生主动参与,乐于探究,培养学生收集和处理科学信息的能力、获取新知识的能力、分析和解决问题的能力及交流与合作的能力。
教学重点
基因工程的基本操作程序的四个步骤
教学难点
从基因文库中获取目的基因
利用PCR技术扩增目的基因
课时安排:2个课时
教学过程
复习提问:
重组技术的基本工具有那些,各自的作用和特点是什么?
2.我们所学过的育种方法有那些其中基因工程育种有那些优点
导入:通过基因工程的概念我们可知,我们能够应用DNA重组技术和转基因技术赋予生物以新的遗传特征,但是无论是DNA重组技术还是转基因技术都需要找到对我们有利的目的基因,我们该如何去寻找目的基因哪,目的基因又将如何连接到载体上哪,以及如何将载体导入受体?这些都是我们所要共同探究的问题!现在让我们共同学习一下基因工程的基本操作。
思考1.我们在前面提到的苏云芽孢杆菌中的抗虫基因、胰岛素基因、干扰素基因等都可以作目
的基因。可是要在浩瀚的“基因海洋”中,找到特定的目的基因可以用什么样的方法和途径呢?
2、基因工程的基本操作程序主要包括: 、
、
新课教学:
基因工程的基本操作步骤主要包括:目的基因的获取;基因表达载体的构建;将目的基因导入受体细胞;目的基因的检测与鉴定。
一.目的基因的获取
1.目的基因:主要是指编码蛋白质的结构基因。
2.目的基因的获取方法:
基因组文库
从基因文库中获取
鸟枪法 cDNA文库
人工合成
(1)从基因文库中获取
基因文库:将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。
构建基因文库的目的:为了在不知目的基因序列的情况下,便于获得所需的目的基因。
基因组文库:含有一种生物的所有基因。
部分基因文库(如cDNA文库):含部分基因,可由mRNA反转录而来。
(2)利用PCR技术扩增目的基因
PCR:是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。
原理:DNA双链复制
原料:模板DNA;RNA引物;四种脱氧核苷酸;热稳定DNA聚合酶(Taq酶);离子
方法:DNA受热变性解旋为单链、冷却后RNA引物与单链相应互补序列结合、DNA聚合酶作用下延伸合成互补链。
特点:指数形式扩增
二.基因表达载体的构建
1.目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在;可以遗传给下一代;使目的基因能够表达和发挥作用。
目的基因:
2.基因表达 启动子:位于基因首端,RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动转录基因
载体的组成 终止子:位于基因尾端,使转录在所需要的地方停下来
标记基因:鉴别受体细胞中是否含有目的基因
方法:同种限制酶分别切割载体和目的基因,再用DNA连接酶把两者连接。
目的基因与运载体结合(以质粒为运载体)
4.条件:同种限制酶、DNA连接酶、ATP(目的基因、启动子、终止子、标记基因)
三.将目的基因导入受体细胞
转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
导入植物细胞:农杆菌转化法(表达载体导入农杆菌,再让农杆菌感染植物细胞)
将目的基因导入受体细胞: 细菌
↓氯化钙
细胞壁的通透性增大
↓
重组质粒进入受体细胞
↓
目的基因随受体细胞的繁殖而复制
②导入动物细胞:显微注射法(将基因表达载体提纯,用显微仪注射到受精卵中)
③导入微生物细胞:Ca2+处理受体细胞成为感受态细胞,再进行混合。
提示:农杆菌转化法的原理是利用农杆菌(胞内寄生菌)对植物的感染而把目的基因导入受体细胞。
四.目的基
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