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羧肽酶研究进展 摘要 : 羧肽酶 (Carboxypeptidase) 是一类可水解肽链 C末端氨基酸残基的蛋白 酶 , 广泛存在于高等植物、动物组织及真菌中 , 主要分为丝氨酸羧肽酶、金属羧肽酶 和半胱氨酸羧肽酶 3 个亚类。本文综述了羧肽酶的研究进展 , 主要包括羧肽酶的应 用、性质、来源分布、克隆表达及研究意义 , 并对其研究前景进行了展望。 关键词 : 羧肽酶 ; 应用 ; 来源分布 ; 性质 羧肽酶是一种专一性地从肽链的 C端逐个降解、释放游离氨基酸的一类肽链 外切酶。在动物、植物的组织器官中 , 羧肽酶发挥着重要的生理功能 , 如胰腺羧肽酶 A 和 B 可用于消化食物 , 羧肽酶 M(CPM)选择性地参与肽类激素的加工 , 羧肽酶 D(CPD) 和羧肽酶 N(CP N)参与肽和蛋白质加工等。如表 1 所示 , 羧肽酶广泛应用于医药、 食品等工业领域。在医药领域 , 由于羧肽酶广泛参与机体的生化反应 , 可通过体内羧 肽酶的检测达到诊断和治疗疾病的目的 ; 此外 , 在医药上还可用于体内不良物质 ( 毒 素等 ) 的降解。在食品工业 , 可用于制备高 F 值寡肽、食品和饲料中赭曲霉素的去 除、用作脱苦味剂等。在生物技术领域 , 羧肽酶可用于多肽的合成及多肽氨基酸序 列测定 , 也可作为模式酶 , 对其他酶的研究提供帮助。动物来源的羧肽酶主要存在于 猪、牛等的胰脏中 , 如羧肽酶 A/B, 其数量非常有限、价格昂贵、导致其应用受到限 制 ; 微生物来源的羧肽酶存在于酵母、曲霉等真菌的液泡中 , 具有广阔的应用前景。 因此 , 借助基因工程策略采用微生物为宿主大量生产重组羧肽酶 , 有望克服羧肽酶生 产过程所遇到的动植物原料来源限制等限制 , 进一步降低生产成本、提高产品质 量、深化酶学性质研究、扩展应用范围。本文综述了羧肽酶的种类、特点以及羧肽 酶基因工程表达策略 , 主要包括羧肽酶的性质、来源分布、克隆表达 , 并对其研究前 景和热点进行了展望。 关键字 : 羧肽酶 ; 应用 ; 来源分布 ; 性质 羧肽酶的种类及其特点 根据羧肽酶活性中心含有丝氨酸残基、金属离子和半胱氨酸残基的不同 , 将羧 肽酶分 , 将羧肽酶分为丝氨酸羧肽酶 (EC3.4.16.-) 、金属羧肽酶 (EC3.4.17.-) 和半 胱氨酸羧肽酶 (EC3.4.18.-) 。 1.1 丝氨酸羧肽酶 丝氨酸羧肽酶又称酸性羧肽酶 , 是一类真核生物蛋白水解酶 , 亚基相对分子质 量 4000 0-75000, 广泛存在于真菌、高等植物和动物组织中。在酸性环境 , 丝氨酸 羧肽酶具有末端蛋白水解酶、酯酶和脱酰胺酶的活性 , 可同时参与多肽和蛋白质的 加工、修饰与降解。由于位切点不同 , 丝氨酸羧肽酶又分溶酶体 Pro-Xaa 羧肽酶 (EC3.4.1 6.2-lysosomal Pro-Xaa carboxypeptidase) 、丝氨酸 D-Ala-DAla 羧肽 酶 (EC3.4.16.4-serine-type D-Ala-DAlacarboxypeptidase) 、羧肽酶 C(EC3.4.1 6.5-carboxypeptidase C) 、羧肽酶 D(EC3