ELISA基础知识及常见问题的处理.pptVIP

ELISA根底知识及常见问题处理;ELISA（酶联免疫吸附试验）;ELISA检测方法 ;间接法 间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体（抗人免疫球蛋白抗体）以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。 其检测方法： 固相(包被)抗原Ag + 样品(抗体Ab) + 酶标二抗Ab* → Ag-Ab-抗Ab* + 底物(TMB)→显色;竞争法 其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多,结合在固相上的酶标抗体愈少,因此阳性反响呈色浅于阴性反响： 固相(包被)抗原Ag + 样品(抗体Ab) + 酶标抗体Ab* → Ag-Ab + 底物(TMB)→不显色(+) 固相(包被)抗原Ag + 样品(无抗体Ab) + 酶标抗体Ab* → Ag-Ab* + 底物(TMB)→显色(-);诊断试剂所用的质量指标及相互关系： ;特异性： 真阴性标本的检出能力。 相对特异性=真阴性/（真阴性+假阳性）×100% 测定及表示方法：质控血清、血清盘、临床标本阴性率。 质控??清、血清盘可以从卫生部临检中心购置,也可以自己配制。自己配制时注意阴性标本的在血清盘中的比例以及代表性。临床标本阴性百分率是临床使用中对试剂盒特异性的粗略的判断。 如果数批产品都通过了特异性参比测定,是否产品的特异性就一样了呢？不一定。因为特异性参比品的数量不可能很大（样本与整