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高密度发酵优点 可提高发酵罐内的菌体密度 提高产物的细胞水平量 相应的减少生物反应器体积 提高单位体积设备的生产能力 降低生物量的分离费用 缩短生产周期 目的：降低生产成本，提高生产效率 第六十二页，共90页 2.9.1 影响高密度发酵的因素 细胞生长所需的营养条件 发酵过程中的培养温度 发酵液的pH 溶氧浓度 有害的代谢副产物 补料方式 发酵液流变学特性 第六十三页，共90页 质粒对菌体生长的影响 中等拷贝数质粒（56 copy）的工程菌，TCL的一些关键酶及与前体合成有关的酶的相对水平增加，这些酶的基因大多是受终产物反馈调节的，外源基因的复制、转录和翻译引起菌体内前体浓度的降低可能是诱导这些酶浓度增加的原因之一。 含高拷贝数质粒（240 copy）的工程菌与宿主菌相比，宿主菌大量前体被利用，引起前体不足，从而产生“严谨反应”。 第三十页，共90页 严谨反应 严谨反应是当氨酰tRNA不足时，核糖体在密码子上停留并合成ppGpp的结果。 ppGpp是一个重要的调控因子，其浓度增加会导致RNA聚合酶在模板上的移动产生停顿，RNA链延长速度减慢，从而使游离RNA聚合酶浓度降低，严谨控制的启动子（如rrnA）转录减少。 另一种观点认为，ppGpp通过干扰RNA聚合酶与PL启动子的专一识别反应，而不是通过影响RNA链的延伸过程来减少转录的。 由于rRNA启动子受“严谨控制”，当菌体内氨