土壤微生物多样性研究报告中总DNA提取技术进展.docxVIP

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土壤微生物多样性研究报告中总DNA提取技术进展 土壤微生物多样性研究报告中总DNA提取技术进展 土壤微生物多样性研究报告中总DNA提取技术进展 个人资料整理 仅限学习使用 土壤微生物多样性研究中总 DNA提取技术进展 纲要:综述了在土壤微生物多样性研究中总 dna 提取技术的研 究进展,剖析了 dna 提取过程中的主要影响要素及存在的问题。 重点词:土壤微生物;多样性; dna;提取技术 中图分类号: 文件表记码: a 文章编 号: 043923-5253-06 advances of total dna extraction technology for soil microbial diversity research xiao bin  ,jiang dai-hua  ,liu li-long  ,liu quan-dong college of agronomy  ,guangxi university  ,nanning 530005,china ) abstract : the influencing factors and application aspects , as well as the potentials and limitations of dna extraction techniques for microbial diversity analysis were reviewed. applying appropriate methods to extract microorganism dna fragment that have right purity and appropriate size from soil were the precondition in soil microbial study on the molecular level , and the subsequent molecular biotechnology operations were all rely on these methods. key words : soil microorganism  ;  diversity  ;  dna  ; extraction method 个人资料整理 仅限学习使用 土壤微生物多样性是生物多样性研究的一个重要领域,是指其在遗传、种类、构造与生态功能方面的变化,对指示土壤微生物群落的稳固性,在保持土壤质量和生态系统稳固性等方面拥有重要意义 [1] ,是现在国内外关注和研究的热门问题之一。 长久以来,因为研究方法的限制,传统的分别纯化培育技术仅能获取土壤中微生物总种群数的 1%左右,而绝大多半微生物当前还不可以获取纯培育 [2] ,未能获取纯培育的微生物才是土壤微生物的主体,所以,有关微生物多样性研究进展不大。 近来几年来,跟着分子生物学技术的发展和研究手段的更新,鉴于土壤微生物群落总 dna 的现代微生物分子生态学研究方法防止了传统分别培育方法的弊端,被宽泛应用于土壤微生物群落构造、功能以及动向监测研究 [3] 。所以作为微生物群落分子剖析方法的基础,最重要的一步就是从土壤样品中尽量毫无误差地提拿出高 质量的、拥有代表性的微生物总基因组 dna。对于土壤微生物 dna 提取方法的报导好多 [4 ,5] ,但是这些方法主要重视于土壤中的细菌群落,极少关注土壤中真菌群落总基因组 dna 的提取方法及其提取成效。此外,细胞裂解不完好、 dna 分子吸附在样品基质颗粒的表面、从样品中同时提取了某些重要酶的活性克制剂、 dna 分子的消耗、降解和损坏等要素也影响着土壤微生物 dna 提取的质量,因此提取土壤微生物总 dna 在研究中尤其重要 [6] 。本文主要 对 dna 提取过程中的主要影响要素、现行各方法的优弊端以及存在的问题作一综述。 个人资料整理 仅限学习使用 鉴于 dna 方法的土壤微生物多样性研究现状 传统微生物学研究方法主要依靠于纯培育技术和显微镜技术, 对土壤微生物多样性的描绘与研究存在必定的限制性。 20 世纪中 后期,跟着土壤微生物多样性研究向多方面发展,人们试试着利 用剖析微生物细胞中某种指示成分,如磷脂脂肪酸 plfa )来研究 土壤微生物的种群构成,可是这些方法的缺点是没法保证细胞中 某种指示成分在土壤中的稳固性,并且假如某种微生物的 plfa 是 未知的,则该不行培育微生物仍难以鉴识 [7 ,8] 。 1980 年, torsvik 等[9] 初次成立了从土壤样品中直接提取细菌 dna 的方法,并于 1990 年将其成功应用于 dna 杂交技术,研究发现 1 g 土壤中有 4 000 个以上不一样的细菌种类

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