银屑病角质形成细胞凋亡与FasFasL表达的关系临床医学.doc

银屑病角质形成细胞凋亡与FasFasL表达的关系临床医学 目录 TOC \o "1-9" \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：银屑病角质形成细胞凋亡与FasFasL表达的关系临床医学 1 1 对象和方法 2 2 结果 3 3 讨论 4 文2：角质形成细胞凋亡的分子机制 5 1 控制角质形成细胞凋亡的调控通路及调控因子 5 2 角质形成细胞的递呈抗原作用 9 3 展望 9 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 银屑病角质形成细胞凋亡与FasFasL表达的关系临床医学 文1：银屑病角质形成细胞凋亡与FasFasL表达的关系临床医学 【Abstract】 Objective To study the relatiohip between keratinocyte(KC) apoptosis and expression of Fas/FasL in the lesio of psoriasis. Methods Apoptosis of KC were measured by TUNEL. Immunohistochemical technique-Avidin biotin comples (ABC) were employed to syudy the expression of Fas,FasL in the lesio of patients. Results Both Fas and FasL were expressed in the lesio , and no expressed in normal higher frequency of apoptosis KC was obseverd in progressive stage of psoriasis lesio,and the frequency reduced in static stage psoriatic lesio and normal skin（P＜）. Conclusio There may be a close relatiohip between the development of psoriatic lesion and apoptosis of KC. Fas/FasL might be involved in the pathogenesis of psoriasis. 【Key Words】 psoriasis keratinocyte apoptosis Fas FasL 近年来银屑病发病与细胞凋亡的关系逐渐受到重视，Fas/FasL是现今研究较多、较为重要的细胞凋亡相关基因。作者应用免疫组化和TUNEL法对银屑病患者皮损中Fas、FasL的表达和皮损中角质形成细胞凋亡进行了检测。结果报告如下 1 对象和方法 研究对象 寻常型银屑病26例，其中男14例，女12例，年龄15～65岁(平均岁)；进行期13例，静止期13例；病程6个月～16年(平均年)。正常对照组10例来自整形外科正常皮肤，其中男6例，女4例，年龄18～51岁(平均岁)。两组患者年龄、性别无统计学差异,具有可比性。 试剂 细胞凋亡检测试剂盒、Fas、FasL兔抗人多克隆抗体（工作浓度均为1：150）购于北京中山生物技术有限公司，用试剂盒附带的肺癌石蜡切片为阳性对照，PBS液代替一抗作阴性对照。 方法 (1)免疫组化：石蜡切片(约4μｍ)常规处理后，微波炉抗原修复，依次加入稀释的一抗、生物素标记二抗、SABC，DAB显色、苏木素复染。结果按着色强弱分级：无着色为0，浅黄色为1，深黄色为2，棕黄色为3。着色范围以在×40倍镜下随机选取5个视野（每个视野计数100个细胞）计数阳性细胞所占的百分比均值，<25%为1，25%～50%为2，>50%为3。上述两项相加即为Fas、FasL表达强度积分，<2为阴性，≥2＜3为弱阳性（+），3～4为阳性（++），>4为强阳性（+++）。(2)TUNEI染色：切片脱蜡入水,蛋白酶K消化15min,置体积分数的H2O室温处理20min,标记缓冲液湿盒中37℃孵育60min,1:50稀释的亲和素-辣根过氧化物酶37℃孵育30min,DAB显色液显色10min,苏木素复染,镜检，细胞核中有棕黄色颗粒者即为凋亡阳性细胞，在每张阳性片随机取5个阳性细胞最多的高倍视野（×400） 计算 凋亡指数（AI） 统计学分析 采用SPSS 软件包处理，样本表达强度比较用秩和检验，细胞凋亡比较用方差分析。 2 结果 Fas、FasL表达强度 阳性信号为胞浆内出现黄色颗粒，以PBS代替一抗的阴性对照切片中，无任何阳性反应。Fas、FasL在正常