海洋来源的口蛄虾生物碱的分离纯化和抗鼻咽癌作用研究.docVIP

海洋来源的口蛄虾生物碱的分离纯化和抗鼻咽癌作用研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：海洋来源的口蛄虾生物碱的分离纯化和抗鼻咽癌作用研究 1 1 材料和方法 3 2 结果 3 3 讨论 4 文2：生姜油抗炎和抗超敏反应作用研究 5 1 材料 6 2 方法 6 3 结果 8 4 讨论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 11 正文 海洋来源的口蛄虾生物碱的分离纯化和抗鼻咽癌作用研究 文1：海洋来源的口蛄虾生物碱的分离纯化和抗鼻咽癌作用研究 Abstract：ObjectiveTo extract effective alkaloid from marine Oratosquilla materials and to study its effect on Nasopharyngeal Carcinoma cell proliferation and extract from marine Oratosquilla was diluted by system solvent. Macroporous absorption resin HP20 column chromatography was used to separate n-Butanol diluted group and total alkaloids were extracted. Auto-chromatography was employed to purify alkaloid. The purified alkaloid molecular weight was analyzed by Mass Spectrometry. MTT method was employed to investigate the inhibitory rate on cells proliferation, and growth curves were protrated at the same time. ResultsAlkaloids were mainly segregated in HP20 chromatographic diluted groups. Purified alkaloid D3 was obtained through Auto-chromatography method. Molecular weight of the purified alkaloid was by Mass Spectrometry technique. The alkaloid D3 had obvious inhibitory effects agait both CNE1 and CNE-2Z marine-derived alkaloid D3 has prominent anti-cancer cell proliferation effects in a time- and dose- manne, and its molecular weight is . Key words：Oratosquilla； Alkaloid； Nasopharyngeal carcinoma； Purification 本研究所利用鼻咽癌细胞株对一批海洋生物进行药物活性筛选，发现了一些具有抑制鼻咽癌细胞系增殖，同时也可以抗EB病毒(Epstein-Barr Virus)增殖的海洋生物［1，2］，其中口蛄虾乙醇粗提物抑制效果最明显，并申请了 中国 发明专利(专利号：ZL )。我们以往的实验证实口蛄虾单次乙醇提取物能显著抑制人鼻咽癌细胞系CNE1、CNE-2Z的DNA合成，降低细胞活性和细胞集落形成能力（周鸿科.《海洋生物1号对人鼻咽癌细胞系CNE-2Z生长的影响及其机制的研究》.2003,广东医学院硕士学位 论文 ）。动物实验证明乙醇粗提物能抑制人低分化鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长和转移（顾帝水.《海洋生物1号对人鼻咽癌细胞系CNE-2Z转移特性及其裸鼠转移瘤的影响》.2004,广东医学院硕士学位论文）。本实验在进一步对活性组分分离纯化的基础上，结合前期的实验基础，确定活性物质的种类和分子信息正是本研究要解决的问题，以期为进一步将其开发成为有效 治疗 鼻咽癌的新药建立可靠的实验基础和依据。 1 材料和方法 细胞培养和药物筛选 CNE1和CNE-2Z鼻咽癌细胞系用含10%小牛血清的细胞培养液RPMI-1640常规培养(37℃，5％CO2)。取对数生长期，生长状态好的细胞用于实验。细胞接种于96孔培养板，每孔200 μl，1×104个细胞