Western-blot(蛋白印迹法)详细步骤.pdfVIP

Western blot 〔蛋白印迹法〕详细步骤 一、 组织的研磨 准备 ：研钵、研磨棒、 EP 管、药匙、液氮、液氮匙、自封袋、一次性手套、棉手套 步骤 ：①用研磨棒将装有冻存组织的 EP 管敲碎，取出组织，在研钵中盛满液氮，用力 敲碎组织，研磨。 ②研磨过程中一旦液氮干了， 立即参加液氮， 保持研磨在液氮中进行， 直至组织 呈干粉状。 ③用在液氮中浸泡过的药匙将研磨好的粉末盛入新的 EP 管中。 ④装有组织粉末的 EP 管现在液氮中保存， 待所有组织都研磨结束后装入自封袋， 于-80 ℃保存。 注意 ： 1.研钵使用前要用锡纸包口、研磨棒用锡纸包头，在烘箱中烘烤 180℃至少 3h 以上。 2.组织研磨成粉末后待液氮全部挥发后再将组织粉末装管。 3.每种样品都最好留有副管，备用。 二、 裂解提蛋白 准备： 裂解液配制比例