酶免疫分析技术.pptVIP

2021/11/21 * 当前,酶免疫技术己与形式各异、各具特点和用途的定位、定量和超微量测定的标记免疫技术融合发展，在医学和生物学中有着广泛的应用。 返回章目录 2021/11/21 * THANK YOU FOR YOUR ATTENTION! 返回总目录 2021/11/21 * （二）双抗体夹心法检测抗原 （1）抗体用包被缓冲液稀释至浓度为10、1和0.1μg/ml,分别在ELISA板上进行包被，洗涤。 （2）在一个横行各包被孔中加入强阳性抗原液，另一横行加入弱阳性抗原液，第三横行加入阴性对照液，温育，洗涤。 2021/11/21 * （3）将酶标抗体用稀释液稀释成三个浓度,例如1:1000、1:5000和1:25000。温育，洗涤。 （4）加底物显色，加酸终止反应后，读取A值。 （5）以强阳性抗原的A值在0.8左右、阴性参考的A值小于0.1的条件作最适条件，据此选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度。 2021/11/21 * 包被抗体的浓度 酶标抗体稀释度 各抗原的吸光度值（A） 强阳性（25ng/ml） 弱阳性（1.5ng/ml） 阴性 10μg/ml 1:1000 1.17 0.15 0.09 1:5000 0.46 0.03 0 1:25000 0.12 0 0 1μg/ml 1:1000 ＞2 0.25 0.10 1:5000