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胶体金免疫层析法快速检测流感病毒应用研究（行业资料） 文档信息 主题： 关于“行业资料”中“医学资料”的参考范文。 属性： F-01L76Z，doc格式，正文22248字。质优实惠，欢迎下载！ 适用： 作为医学资料、医学资料写作的参考文献，解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容摘取等相关工作。 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：胶体金免疫层析法快速检测流感病毒应用研究 2 1对象和方法 2 文2：探析胶体金免疫层析法快速检测李痘病毒的研究 5 一、研究材料 6 二、研究方法 6 (1)设计扩增该病毒外壳蛋白基因的引物 7 (2)RT-PCR条件 7 (1)PCR产物的回收：参照试剂盒说明进行。 7 (1)制备胶体金20～30nm的颗粒 9 (2)抗体胶体金结合 9 (3)制备硝酸纤维素膜 9 (4)李痘病毒固相抗体NC的制备 9 (5)组装NC膜试纸条 9 三、结果与分析 10 四、结束语 12 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 14 正文 胶体金免疫层析法快速检测流感病毒应用研究（行业资料） 文1：胶体金免疫层析法快速检测流感病毒应用研究 0引言 目前检测流感病毒的方法很多，但都存在各种不足，免疫金标记技术是以胶体金作为示踪标志物，基于抗原抗体反应原理而产生的一种新型免疫标记技术. 其中免疫层析技术（GICA）因其具有检测速度快、敏感度高、特异性好、操作简便等特点，已在医学检验中广为应用［1］. 我们应用GICA法检测患者鼻咽部分泌物中的流感病毒A，B（influenza virus A，B，Flu A，B）抗原，并与间接免疫荧光法（IFA）做对照，对GICA法检测流感病毒方法作出科学、客观的评价，验证此方法在流感病毒检测中的可靠性，并探讨其应用价值. 1对象和方法 对象北京军区总医院及解放军第306医院于200702/200801收治的各种急性呼吸道疾病患者532（男336，女196）例，年龄15～98（±）岁. 病种包括肺炎、上呼吸道感染、急性支气管炎、慢性阻塞性肺疾病、发热待查、肺癌、间质性肺病等. 对以上患者用细导管鼻咽部负压吸取法采集其鼻咽部分泌物作为本研究的实验样本. 胶体金免疫层析法试剂盒： Flu A型（国药准字S），Flu B型（国药准字S）均由北京阿斯可来生物工程有限公司提供，有效期内使用. IFA法所使用抗Flu A，B mAb由北京庄笛浩禾生物技术公司提供，有效期内使用. IFA法所使用二抗： 异硫氰酸荧光素（FITC）标记山羊抗小鼠IgG购自北京中杉金桥生物技术公司，有效期内使用. 方法 法检测于患者入院24 h内进行，使用定制的玻璃试管中加入5 mL缓冲液（PBS），一端连接负压吸引器，一端连接细塑料导管，操作时将细导管经鼻腔插入7～8 cm到达鼻咽部，接通负压，旋转细导管并缓慢退出，吸取分泌物1～2 mL分泌物，后用滴管吹打数次（必要时加入抗粘液剂），然后将细胞悬液离心，弃上清，取沉淀液少许充分溶于裂解液中，用细管吸取裂解液，3～4滴于检测卡加样孔中，10～15 min后观察结果，在检测区和对照区各出现一条红色色带为阳性，仅在对照区出色一条红色色带为阴性. 法检测与GICA法同时进行，将用上述方法取得的同一患者的鼻咽部分泌物离心后弃上清液，取沉淀细胞涂片，风扇吹干后丙酮固定. 在制备好的细胞涂片上分别加入Flu A,B特异性单克隆抗体20 μL，置37℃恒温箱20 min，取出后用PBS液冲洗3遍，PB液洗1次，风干. 加入FITC标记的二抗，置37℃恒温箱20 min，洗片同上. 荧光显微镜下观察结果，病毒感染的鼻咽部纤毛柱状上皮细胞质内呈分泌物草绿色荧光，找到3 个以上典型感染细胞为阳性. 统计学处理： 应用 for windows 建立数据库，进行临床诊断一致性Kappa检测，检测两种方法的吻合程度，计算出Kappa值，并进行配对设计的McNemar χ2检验. 2结果 法与IFA法比较532例取鼻咽部分泌物分别用GICA法与IFA法检测FluA，B. 应用GICA法检出FluA抗原阳性59例次，其中4例IFA法测阴性；应用GICA法检出FluA抗原阴性473例次，其中5例IFA法检测阳性. GICA法检出FluB抗原阳性31例次，其中2例IFA法检测阴性； GICA法检出FluB抗原阴性501例次，其中3例IFA法检测阳性. GICA法检测Flu阳性结果见图1. 图1GICA法快速诊断试纸条检测Flu结果 临床诊断一致性Kappa检测GICA法检测FluA，B结果与IFA法结果进行一致性检验