细胞计数方法------细胞计数板法.docx

word 细胞计数方法 ------ 细胞计数板法 实验原理： 当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细 胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 具体操作： 1. 将计数板与盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。 2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静 置 3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。 3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算： 细胞数 /mL=四大格细胞总数 /4 × 104 个/ml ( 注： 当细胞很多时，可在四个格中选一定数目较平均的小格，由于每大格中有 16 个小格，然后计左侧和上方的细胞数，求出每小格的细胞数，取平均值 m， m ×16 即每个格的平均值。所以，细胞密度 =m×16×10 4 个/ml) 说明： 公式中除以 4，因为计数了 4 个大格的细胞数。 公式中乘以 10 4 因为计数板中 每一个大格 的体积为： 1.0mm 〔长〕× 1.0mm〔宽〕× 3 而 1ml=1000ul=1000mm3 〔注意： 镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，假如细 胞团 10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。 〕 ===================