中图版高中生物考点加强课6限制酶的选择原则.docxVIP

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2021-12-10 发布于天津
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中图版高中生物考点加强课6限制酶的选择原则.docx

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1.限制酶的选择原则根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类应选择切点位于目的基因两端的限制酶，以便将目的基因“切出”，如图甲可选择 PstⅠ。不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，以防破坏目的基因，如图甲不能选择 SmaⅠ。为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用 Pst Ⅰ和 EcoR Ⅰ两种限制酶 (但要确保质粒上也有这两种酶的切点 )，而且这种切点不致于破坏所有的“标记基因”以及启动子和终止子。根据质粒的特点确定限制酶的种类 ①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性