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- 2021-12-13 发布于山东
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精选文档
细菌总数检测操作规程
原理
试样经过办理,稀释至合适浓度,在必定条件(如使用特定的培育基,在温度 30℃±
1℃培育 72h±3h 等)下培育后,所得 1g( mL )试样中所含细菌总数。
试剂与仪器
所用用具
三角烧瓶、玻璃珠、具塞试管、培育皿、 1000μL 枪头、 5mL 枪头、称量勺、接种环、
接种针、移液器
仪器:解析天平、恒温培育箱、微型振荡器、超净工作台、高压灭菌锅
所用试剂和培育基
营养琼脂
取营养琼脂,加入蒸馏水 1L,搅拌加热 至完整溶解,分装三角瓶, 121℃高压
灭菌 15min,备用。
3、操作步骤
配制 0.85%生理盐水。
称取氯化钠 8.5g 溶于 1000mL 蒸馏水中。
三角烧瓶加入生理盐水 90mL和玻璃珠,试管中加入生理盐水 9mL ,121℃灭菌 30min。
(三角烧瓶个数与样品数目一致,试管数目与稀释次数相关)
将1000μL 枪头、培育皿、 5mL 枪头、称量勺, 121℃灭菌 30min。(注意计算数目)
将枪头、培育皿置于烘箱
103℃烘干。 ( 1-3 步需提前一天完成)
对称量房间进行紫外灭菌
30 分钟,关灯静置 60 min。以无菌操作取样品
10g 于含 90mL
生理盐水三角烧瓶中,于振荡器上振荡
30min,制成 1:10 的均匀稀释液。
用1000μL 枪头汲取 1:10稀释液 1mL ,沿管
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