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保健食品有助于控制体内脂肪检验方法 1 动物实验 1.1 原理 本方法是以高热量食物诱发动物肥胖，再给予受试样品（肥胖模型），或在给予高热量食物同时给予受试样品（预防肥胖模型），观察动物体重、体内脂肪含量的变化。 1.2 仪器及试剂 动物天平，解剖器械等，戊巴比妥钠。 1.3 实验方法 1.3.1 实验动物 选用雄性大鼠，适应期结束时，体重200±20g，每组8-12只。 1.3.2剂量分组及受试样品给予时间 实验设三个剂量组和一个模型对照组，以人体推荐量的5倍为其中的一个剂量组，另设两个剂量组，必要时设阳性对照组和空白对照组。受试样品给予时间至少给予6周，不超过10周。 1.3.3高热量模型饲料 在维持饲料中添加15.0%蔗糖、15.0%猪油、适量的酪蛋白、磷酸氢钙、石粉等。除了粗脂肪外，模型饲料的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分、钙、磷、钙：磷均要达到维持饲料的国家标准。 1.3.4 实验步骤 1.3.4.1肥胖模型法 1.3.4.1.1适应期：于屏障系统下大鼠喂饲维持饲料观察5－7天。 1.3.4.1.2造模期： 适应期结束后按体重随机分成2组，10只大鼠给予维持饲料作为空白对照组，60只大鼠给予高热量模型饲料。每周记录给食量、撒食量、剩食量，称量体重1次。 喂养2周后，给予高热量饲料的60只大鼠按体重增重排序，淘汰体重增重较低的1/3肥胖抵抗大鼠。将筛选出的40只肥胖敏感大鼠再给予高热量饲料6周，空白对照组同时给予维持饲料。 1.3.4.1.3受试样品给予： 造模期结束后，40只肥胖敏感大鼠按体重随机分成4组，分别为模型对照组和三个剂量组。每周记录给食量、撒食量、剩食量，称量体重1次。模型对照组和三个剂量组给予高热量模型饲料，空白对照组给予维持饲料。各剂量组灌胃给予不同剂量的受试样品，模型对照组和空白对照组给予等量的相应溶剂，受试样品给予时间6周，不超过10周。 试验结束后，称体重，1%戊巴比妥钠（0.5mL/100g BW）麻醉，解剖取肾周围脂肪、睾丸周围脂肪，并称重，计算脂/体比。 1.3.4.2预防肥胖模型法 1.3.4.2.1适应期：于屏障系统下大鼠喂饲维持饲料观察5－7天。 1.3.4.2.2造模筛选期： 适应期结束后按体重随机分成2组，10只大鼠给予维持饲料作为空白对照组，60只给予高热量饲料作为模型组。每周记录给食量、撒食量、剩食量，称量体重1次。喂养2周后，给予高热量饲料的大鼠按体重增重排序，淘汰体重增重较低的1/3肥胖抵抗大鼠。 1.3.4.1.3受试样品给予： 将筛选出的40只肥胖敏感大鼠按体重随机分成4组，分别为模型组和三个剂量组。模型对照组和三个剂量组给予高热量模型饲料，空白对照组给予维持饲料。各剂量组灌胃给予不同剂量的受试样品，模型对照组和空白对照组给予等量的相应溶剂，受试样品给予时间6周，不超过10周。每周记录给食量、撒食量、剩食量，称量体重1次。 试验结束后，称体重，1%戊巴比妥钠（0.5mL/100g BW）麻醉，解剖取肾周围脂肪、睾丸周围脂肪，并称重，计算脂/体比。 1.3.5 观察指标 体重、体重增重、摄食量、摄入总热量（摄食量×每公斤饲料热量）、食物利用率、体内脂肪含量（睾丸及肾周围脂肪垫）、脂肪/体重。 1.4 数据处理和结果判定 一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。采用方差分析加q检验进行统计。 实验组的体重或体重增重低于模型对照组，体内脂肪含量或脂/体比低于模型对照组，差异有显著性，摄食量不显著低于模型对照组，可判定该受试样品有助于控制体内脂肪动物实验结果阳性。 2 人体试食试验 2.1 原理 单纯性肥胖受试者食用受试样品，观察体重、体内脂肪含量的变化及对机体健康有无损害。 2.2 仪器 体成分测定设备、功率自行车、心率监测器、B超、皮卡钳、体重计。 2.3 试验方法 2.3.1 受试者纳入标准 受试对象为单纯性肥胖人群，成人BMI≥30，或总脂肪百分率达到男25%，女30%的自愿受试者。 2.3.2 受试者排除标准 2.3.2.1 合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾病，精神病患者。 2.3.2.2 短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者。 2.3.2.3未按规定食用受试样品，无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判断者。 2.3.3 试验设计及分组要求 2.3.3.1不替代主食的