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猪血清分离技术
猪血清分离技术
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猪血清分离技术
猪血清分离技术
血清分离,看你的要求,对于溶血程度,是否要求无菌等等,看你那的有要求什么的;用我的经历举例,我们的要求是尽可能无菌或减少污染,除了超净工作台之类的,我说通用的;一、通过自然凝固的方法:1、对于血液自然分离来说,选择呈装的材质最好是玻璃材质,它的分离效果要比塑料的材质好;2、室外的温度不能过低,最好是25-30℃,因为由于血液体内的温度是37℃,到体外室温低的话,由于热胀冷缩,细胞破裂多,溶血后,血红素溢出会溶血增加;3、有条件的话,而且容器也不大的情况下,可以放置恒温箱中30分钟个小时,如果能倾斜30度左右放置,效果更好,但是最好不要超过2个小时,不然溶血也会增加;4、没有条件,可以室温倾斜放置过夜,第二天同样能得到淡黄色的血清;5、为了得到更多的血清,这个时候我会移出血清,然后剩余的血块再3000rpm离心15-20分钟,这样还能得到一点;然后剩余的血块再放置在4℃冰箱再过夜,还能获得一些血清,但是这个时候的血清已经是溶血的血清了;二、通过离心的方法:(加抗凝剂)1、高速离心机(3000-12000rpm),首次离心不宜超过3000rpm,因为容易溶血,我一般2000rpm15分钟,因为我要除了要血浆外,还要完整的血细胞;2、血浆再7000rpm,就能获得最理想的血浆量了;备注:我的呈装的容器是250ml葡萄糖瓶,因为需要无菌,所以都是分装后,然后上丁基胶塞离心或者自然分离;还有般情况下,自然析出的血清一般占总血的量35-45%;但是血浆的话,血浆占总血液体积的60-70%,量很可观。
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