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休止细胞的制备以及MTT法测脱氢酶活性 休止细胞的制备与mtt法测定脱氢酶活性 第2022类生活基础秦宇杰学生编号：[ 1 ********* ]第92022类生活基础石成瑞学生编号：[********* ]第8类生活基础程前学生编号：202200140 指导老师张怀强 （山东大学微生物技术国家重点实验室） 摘要休止细胞中基本不含内源营养物质，可以很好地用来研究微生物新陈代谢过程及生理生化性质等。mtt比色法灵敏度高，被广泛用来研究细胞的生物活性。本实验即利用休止细胞，通过mtt比色法进行酶催化的动力学分析来研究三羧酸循环中的各种脱氢酶活性随底物浓度的变化情况以及在循环体中的相对顺序。 关键词静息细胞MTT比色法三羧酸循环底物浓度酶催化动力学分析 1.实验背景 酶。因此，研究脱氢酶活性随底物浓度的变化以及各种酶催化的相对顺序具有重要的价值。 2.实验原理 2.1静息细胞 休止细胞又称静息细胞，把培养液中各种营养物质和生长因子洗去后悬浮在生理盐水中培养一段时间，以消耗内源营养物质，呈呈饥饿状态的细胞，在研究微生物的生理生化及新陈代谢中有广泛的应用。它的主要特性就是细胞虽 图1三羧酸循环 然处于休眠状态，不进行生长繁殖，但仍含有各种酶系，具有氧化和发酵能力，在适宜条件下可再恢复生长。