基因毒性杂质作用原理-中文版.docx

PAGE PAGE 1 基因毒性杂质作用原理-中文版 遗传毒性致癌物发生致癌和致突变的作用，第一步一般认为都是和DNA发生反应。从机理上理解基因毒性杂质的作用原理，不用死记硬背，就能轻松记住所有的基因毒性杂质。  根据Miller的理论：  致癌物要么是亲电试剂，要么可以代谢成亲电试剂。然后和DNA的亲核基团发生反应。  DNA的亲核活性基团主要有：  ?碱基上的氮  ?碱基上的氧  ?磷酸酯骨架  先来看一下DNA的结构  双螺旋的DNA主要含有四个碱基，分别是腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶以及磷酸酯的串联骨架。  这些嘧啶和嘌呤上面的氮氧都富有电子，如果遇见一些缺电子的试剂，很容易发生取代等反应。  事实上，DNA的反应种类除了只反应某一处位点外，还会有一些比较复杂的反应类型：  ?可以看到有的碱基上不仅含有一个亲核位点，如果一个致癌物有两处亲电位点，反应一处后，还会和碱基的另外一个位点反应，生成一些小环。  ?双亲电基团的另外一个基团也有可能和两个不同的碱基链接，甚至可以和两个螺旋上的不同碱基链接。  ?也会有可能另外一个基团和蛋白质反应，造成DNA-蛋白质的链接。  DNA的反应活性除了亲核性之外，主要受空间结构的影响。  Guanine中的N7位置位于DNA双螺旋的大沟槽处，空间较大，容易和亲电试剂接触，反应活性显然要比Adenine中处于小沟槽中的N3（红色数字）要高。  当然根据结构也能预知，Adenine的N1和Cytosine的N3（绿色数字）位置处于狭窄的分子空间内，又有氢键相连，所以基本上没有反应活性。DNA反应并不都是反应在氧和氮上，比如粉红色的C8位置也能发生反应，不过该反应也是先和相邻的N7反应然后重排到C8。  纯粹的理论说明略显枯燥，下面会详细介绍每一类含有警示结构的致癌物。  酰化试剂  酰基卤化物  酰基卤化物由于卤原子电负性较大，吸引电子，导致羰基碳非常缺电子，一旦和DNA接触，会和腺嘌呤的羰基氧发生酯化反应。  二甲氨基甲酰氯和二乙氨基甲酰氯被IARC归为致癌物2A类。   异氰酸酯是具有多种商业应用的高活性化合物。广泛用于制造聚氨酯泡沫、弹性体、涂料、粘合剂、涂料、杀虫剂和许多其他产品。单芳基异氰酸酯是制造药品和农药的重要中间体。  观察到胞嘧啶、腺嘌呤和鸟嘌呤的外环氨基上的氨和异氰酸酯反应，胸腺嘧啶未检测到加合物。  烷基化直接作用试剂   一般烷基为小于5个碳的小分子烷烃，因为烷烃为供电子基团，碳原子越多，给电子能力强，磺酸、磷酸的诱导作用减弱，烷基的亲电变差，反应活性减弱。  磷酸酯中P和C都是亲电位点，和DNA反应主要有两种反应机理：  ?亲核试剂进攻烷基碳  ?亲核试剂进攻磷原子  第一种机理是遗传毒性主要的因素，烷基越小反应活性越高。  有机磷农药不仅具有遗传毒性，还有神经毒性。通过一些数据已经观察到有机磷杀虫剂可以使Guanine的N7位置烷基化。  磺酸酯类主要是通过使DNA烷基化发挥遗传毒性。  烷基化的反应机理分为两种：  ?通过SN1反应机理，一般是小分子烷烃，比如磺酸甲酯、磺酸乙酯。  DNA烷基化的主要位点是鸟嘌呤的N7。  ?通过SN2反应机理，一般是支链烷烃，比如磺酸异丙酯。DNA烷基化的主要位点是鸟嘌呤的O6。  值得着重介绍一下的是Busulfan，白消安，1，4-双（甲基磺酰氧）丁  烷。是一种双功能烷化剂，可以和两分子鸟嘌呤反应产生鸟嘌呤-鸟嘌呤桥，将DNA相互交联。   该类物质属于代谢后产生活性甲醛，发挥遗传毒性。  甲醛属于高活性致癌物，会和DNA发生多种反应。详见后面醛类遗传毒性杂质。   硫芥和氮芥的反应机理类似。  首先是一个氯原子离去，形成氮杂环丙烷1，然后被鸟嘌呤的N7位开环成2，另外一个氯原子离去，再次形成氮杂环丙烷3，3可以被水开环成4，也可以和另外一分子的鸟嘌呤反应，成两分子交联。  正是由于它们可以诱导DNA链间交联，使DNA丧失了复制能力，所以导致高度的遗传毒性和细胞毒性。   β内酯四元环具有很大的张力能，因此遇到亲核试剂很容易开环。  和DNA的反应主要发生在鸟嘌呤的N7处以及腺嘌呤的N1处，生成羧乙基衍生物。  γ-磺酸内酯反应类似。   环氧乙烷是常见的环境污染物，会产