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高中生物知识点《多聚酶链式反应扩增DNA片段》
多聚酶链式反应扩增DNA片段： 1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5端自3端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。 2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸 3、结果：上述三步反应完成后，一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。 细胞被DNA复制与PCR技术的比较： 知识点拨： 1、DNA分子复制的人工控制 解开螺旋：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。 恢复螺旋：在50～60℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。 复制条件：缓冲液，DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种引物。 控制仪器：PCR仪（温度周期性自动调节仪）。 2、PCR的含义是多聚酶链式反应。 3、PCR技术反应的条件：①稳定的缓冲溶液环境；②DNA模板；③合成引物；④四种脱氧核甘酸；⑤DNA聚合酶；⑥温控设备 4、PCR技术最突出的优点是快速、高效、灵活、易于操作。 5、TaqDNA聚合酶的特点是：耐高温。 知识拓展： 1、DNA含量的测定——分光光度法 2、DNA聚合酶不恩能够从头合成DNA，只能从DNA的3端开始延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。
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