部分免疫项目检测路径及结果分析讲稿.ppt

抗TP、抗HIV、抗HCV的检测路径及结果分析 德阳市人民医院检验科 刘利洪 梅毒螺旋体抗体(抗TP-Ab)检测路径及结果分析 一、梅毒血清学检测程序 （+） 非梅毒螺旋体抗原血清试验（TRUST) （-） 阴性报告 （+） 现症梅毒 （-） 询问梅毒既往感染和治疗史 抗梅治疗，疗效观察 （有） 既往感染 （无） 随访或抗梅治疗 梅毒螺旋体抗原血清试验（TP-ELISA、TPPA等） 梅毒血清学检测程序的比较 （1）先以非梅毒螺旋体抗原血清试验（RPR、TRUST等）进行初筛，再以梅毒螺旋体抗原血清试验（TPPA、TPHA、TP-ELISA等）进行确认。 优点：非梅毒螺旋体抗原血清试验价格低廉，使梅 毒检测的成本可以保持在低水平 缺点：非梅毒螺旋体抗原血清试验的敏感性较差，导致临床上易出现漏检的情况 (2) 同时进行梅毒螺旋体抗原血清试验和非梅毒螺旋体抗原血清试验 优点：这是从技术上而言的最佳方案 缺点：人力和试剂成本较高 (3) 先进行梅毒螺旋体抗原血清试验，阳性时再进行非梅毒螺旋体抗原血清试验 优点：可分清现症病人或既往感染，人力和试剂成本较低。 二、梅毒的血清学试验（1） 梅毒血清学实验方法分为两大类： 非梅毒螺旋体抗原血清试验和梅毒螺旋体特异性抗原血清试验。 非梅毒螺旋体抗原血清试验：是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原检查血清中的反应素，用于初筛试验及疗效观察。可以分为以下四种试验，原理基本相同： 1、性病研究实验室玻片试验（VDRL) ：由于试剂需现配现用，故而国内实验室很少采用。但VDRL是唯一可用于神经性梅毒诊断的血清学方法。 2、快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)：在特制的纸片上进行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗体出现凝集，用肉眼可观察结果。 3、甲苯胺红试验（TRUST)：在试剂中加入甲苯胺红代替炭粉颗粒，使结果更易于观察。 4、不加热血清反应素试验（USR) 梅毒的血清学试验（2） 非梅毒螺旋体抗原血清试验的缺陷： 1、特异性：由于在多种疾病，如急性病毒性感染、自身免疫性疾病、结缔组织病、静脉吸毒者以及怀孕妇女中均可出现反应素，所以此类试验有时会出现假阳性反应。 2、敏感性：非梅毒螺旋体抗原血清试验有时出现弱阳性或阴性结果，而临床上又像二期梅毒，此时应将此血清稀释后做定量试验，如出现阳性结果，则为抗体过量引起的前带现象。1－2％二期梅毒病人可出现此现象而发生梅毒血清假阴性反应。此外，由于感染梅毒后反应素的出现晚于特异性梅毒螺旋体抗体，晚期梅毒反应素又可能转阴，因此这类试验不适于一、三期梅毒，对隐性梅毒和神经梅毒也不敏感。因此此类试验做梅毒初筛时，存在一定数量的漏检。 非梅毒螺旋体抗原血清试验的优点： 1、非梅毒螺旋体抗原血清试验表现为滴度随疗程逐渐下降，故可以作为疗效观察的指标。 2、此类方法价格低廉。 梅毒的血清学试验(3) 梅毒螺旋体抗原血清试验：用梅毒螺旋体作为抗原检测血清中的抗梅毒螺旋体IgM和/或IgG抗体，其敏感性和特异性均较高。常用的有以下五种方法： 1、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS) 2、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA） 3、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA) 4、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA） 5、梅毒螺旋体快速诊断试验（TP-RT） 梅毒的血清学试验(4) 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS) FTA-ABS是所有螺旋体试验中最敏感的方法，特异性也很高，被认为是检测梅毒的“金标准”。 但是，该方法在技术操作上也是最困难的，试验的操作以及结果的判读都必须加以核实。试验可靠性的关键是标准化的结果判断、高质量的荧光标记抗体以及适当的稀释度。由于实验室操作繁琐以及主观判读经常产生错误结果，因此增加标记荧光标记染料的复染可以减低标准化过程中的错误并增加其可读性及重复性。 实验需有优质的荧光显微镜和技术熟练的操作人员才能得到准确的结果，故常不被临床实验室作为首选方法。 梅毒的血清学试验(5) 梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA） 原理： 用超声裂解的梅毒螺旋体为抗原，致敏经醛化 鞣化的羊或禽类红细胞，此致敏红细胞与人血清 或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合，产生肉眼可观察的凝集反应 优点：该方法比FTA-ABS易操作且稳定性好，它的敏感 性除早期梅毒外与FTA-ABS相似，对大样本进行 批量检测时，TPHA也比FTA-ABS易操作，是国内实验室常用的梅毒螺