生物质谱：绪论与离子化方式.ppt

生物质谱绪论 一、 前言 1). 质谱技术的特点 质谱仪是一个用来测量单个分子质量的仪器(Thompson)．但实际上质谱仪提供的是分子的质量与电荷比(m/z or m/e). 质谱法是一强有力的分析技术。它可用于未知化合物的鉴定、定量分析、分子结构及化学特性的确定等方面； 所需化合物的量非常低：10-12g, 或10-15 mole； 应用范围广: (1) 有机质谱法：生物、医药、聚合物、法医和环境等方面；(2) 无机质谱法： 地球化学，地质矿产和无机元素分析鉴定等方面。 在进行质谱测试时，将中性的样品通过合适的电离方法形成带有正电荷或负电荷的离子进行检测。这种电离方法就称为离子化方法，实现这一功能的装置叫离子源。 2). 质谱离子化与质量分析器技术的发展 七十年代初用于小分子分析鉴定的电离技术，如：电子轰击(Electron impact, EI)电离和化学电离(Chemical ionization, CI)技术等。 质量分析器主要为磁场分析器(magnetic Sector)。 七十年代末、八十年代初出现了场解吸(Field desorption, FD)、场电离(Field ionization, FI)和快原子轰击(Fast-atom bombardment, FAB)技术。质量分析器主要为磁场分析器(sector)、四极杆滤波器(quadrupole,Q)和离子回旋共振(ion cyclotron resonance, ICR )分析器。 近十几年出现了大气压电离(atmospheric pressure ionization, API)，包括大气压化学电离(atmospheric pressure chemical ionization, APCI)和电喷雾电离(eleotrospray ionization, ESI) 、基质辅助激光解吸电离(matrix-assisted laser desorption/ionization, MALDI)技术和大气压光电离（ Atmospheric pressure photoionization APPI）源 .质量分析器为磁场分析器(sector)、 四极杆滤波器(quadrupole,Q)、离子阱分析器(Ion trap)、离子回旋共振(ion cyclotron resonance, ICR )分析器和飞行时间分析器(Time-of-flight, ToF)轨道阱(Orbitrap 。 Inlet Ion source Mass Filter Detector Data System High Vacuum System MALDI API大气压电离 (Electrospray电喷雾IonSpray离子喷雾 ApCI大气压化学电离) FAB快原子轰击 EI CI化学电离 TOF Quadrupole Ion Trap Magnetic Sector FTMS ABI SCIEX API LC/MS/MS Systems Taking triple quadrupole technology into the next century Q-trap API4000 How Does a Mass Spectrometer Work? Inlet 离子化、desorption Analyzer 质量区分 Ion Detection 检测 数据处理 Source + 1330 1340 1350 100 75 50 25 0 进样 Method to vaporize sample ? Solid ? Liquid ? Vapor Detect ions Form ions (charged molecules) Sort Ions by Weight (m/z) 质谱图 API Analytical Domains IonSpray Heated Nebulizer-APCI GC/MS 101 102 103 104 105 Molecular Weight Neutral Ionic Analyte Polarity 质谱的离子化方式及其原理 电子轰击法（Electron Impact） 有机化和物在高真空中受热气化后，受到具有一定能量的的电子束轰击失去电子变成分子离子。 M → M+ ? e 特点：产生正离子 谱图再现性好 碎片离子信息丰富 不适用：不稳定样品分子、不能汽化分子、遇热分解的分子. 气体分子 离子束 电子束 化学电离(Chemical Ionization) 将反应气体（甲烷、丙烷、异丁烷、氨气、水蒸气）引 入离子化室，在电子轰击源（200－500eV)的轰