生物制药工艺学：第五、六章 吸附与离子交换.ppt

吸附法基本原理 吸附作用力:定向力,诱导力,色散力 定向力:极性分子间产生的作用力,分子极性越大,定向力越大,与热力学温度成反比. 诱导力:极性分子和非极性分子之间的吸引力,与温度无关. 色散力:非极性分子之间的引力,随最外层电子数增多而增加,不取决于温度. 物理吸附与化学吸附的特点 氧化铝 氧化铝的吸附能力很强，可以活化到不同程度，重演性好，再生容易，故是常用的吸附剂之一。分酸性、碱性和中性三种， 酸性氧化铝(pH4-5)适合于分离酸性化合物， 碱性氧化铝(pH9-10)适合于分离碱性化合物， 中性氧化铝(pH7)适合于分生物碱、挥发油、萜类、甾体及在酸、碱中不稳定的甙类、酯类等化合物。 大孔树脂的应用 吸附法特点 优点： (1)设备简单、操作简便、价廉、安全。 (2)少用或不用有机溶剂，吸附过程中pH变化小，较少引起生物活性物质的变性失活。 缺点： (1) 选择性差，收率不高。 (2)一些无机吸附剂性能不稳定 离子交换层析 离子交换层析是以离子交 换剂为固定相，以特定的含 离子溶液为流动相，利用离 子交换剂对待分离的各种离 子结合力的差异，而将混合 物中不同离子进行分离的层 析技术。 离子交换树脂的结构与分类 离子交换介质的选择原则 离子交换速度 设有一颗树脂放在溶液中，发生下列交换反应： A+ ＋ RB RA + B+ 和所有多相化学反应一样，离子交换过程应包括下列五个步骤： 功能基团: 与载体共价 结合的固定 的活性基团 平衡离子: 与功能基团以离子键联结的 可移动的活性离子 不溶性载体: 惰性的高分 子固定骨架 离子交换树脂由三部分构成 平衡离子带正电荷的为阳离子交换树脂，平衡离子为负离子者称阴离子交换树脂。 离子交换树脂结构 骨架：接有功能基团，本身是惰性 功能基团：连接在骨架 上，可与相反离子结合 待交换分子：在吸附阶段可与活性离子交换，与骨架上的功能基团结合 活性离子：与功能基团所带电荷相反的可移动的离子 离子交换法概述 离子交换法概述 活性离子为阳离子，称阳离子交换树脂， 与阳离子发生交换 活性离子为阴离子，称阴离子交换树脂， 与阴离子发生交换 主要依赖电荷间的相互作用，利用带电分子中电荷的微小差异而进行分离。 选择适当条件可使一些溶质分子变成离子态，通过静电作用结合到离子交换剂上，而另一些物质不能被交换，这两种物质就可被分离。 带同种电荷的不同离子虽都可以结合到同一介质上，但由于带电量不同，与介质的结合牢度不同，改变洗脱条件可依次被洗脱而达到分离的目的。 离子交换层析原理 + - 等电点 吸附阴离子交换剂 吸附阳离子交换剂 pH pI（+） pH = pI（0） pH pI（-） 蛋 白 质 净 电 荷 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 pH pH小于等电点时，物质带正电荷，可以与阳离子交换剂进行交换。? pH大于等电点时，物质带负电荷，可以与阴离子交换剂进行交换； 蛋白质等两性电解质，可根据其pI值来选择 惰性骨架由高分子碳链构成，是一种多孔性海绵状不规则网状结构，它不溶于一般的酸、碱溶液及有机溶剂。按骨架不同，离子交换树脂可分为加聚型与缩聚型两类。前者有聚苯乙烯类与丙烯酸类等，后者有酚醛类。 在惰性骨架中引入交换基团后，便成为具有离子交换功能的树脂。 为改善树脂的性能，还应在惰性骨架中添加交联剂、致孔剂、加重剂以及磁性材料等辅助材料。 按所带交换基团的性质不同，离子交换树脂大致可分为阳离子交换树脂和阴离子交换树脂两大类。 (1) 阳离子交换树脂 阳离子交换树脂是一类骨架上结合有磺酸和羧酸等酸性功能基，可与阳离子进行交换的聚合物。按功能基酸性强弱程度的不同，阳离子交换树脂可分为强酸性和弱酸性两大类。阳离子交换树脂R－SO3H或R－COOH可在水中电离，电离方程式为 R－SO3H → R－SO3- ＋ H+ R－COOH → R－COO- ＋ H+ ①强酸性树脂 具有－SO3H、－PO3H2、－HPO2Na、－AsO3H2、－SeO3H等功能基的树脂极易电离，其酸性相当于盐酸或硫酸，故属强酸性阳离子交换树脂。此类树脂可在酸性、中性和碱性条件下与水溶液中的阳离子进行交换。 对于H型阳离子交换树脂，离子交换方程式为 R－SO3H ＋ NaCl → R－SO3Na ＋ HCl 对于盐基型阳离子交换树脂，离子交换方程式为 2R－SO3Na ＋ MgCl2 → (R－SO3)2Mg ＋ 2NaCl