生物质谱：质谱概述.ppt

分子量相近多肽的分离 质量精度 定义：实测分子量和理论分子量接近程度 表示方式： 只有高分辨才能实现高精度 质量精度应用举例 Thank you! * * 质量分析器： 　 它是质谱仪的核心，它的作用就是将不同质荷比的离子分开。不同种类的质量分析器构成不同的质谱仪。目前使用的主要是磁偏转式和四极杆式。　1．磁偏转式 磁偏转式质量分析器实际上是一个处于磁场中的真空容器。在离子源中被加速而具有一定动能的离子进入分析器后，受到磁场力的作用，将在磁场中作匀速圆周运动（如下图）。这里，我们可以得到下面两个方程式：　　　　　　　　　　　  　　　　  在质谱仪中，检测器是固定的，即R为固定值。若磁场强度H和电压V为某一固定值时，只有一定质荷比的离子可以到达检测器。但若连续改变H或V时，就可使不同质荷比的离子都被检测。　 扇形磁场： 　 　扇形磁场是历史上最早出现的质量分析器，除了在质谱学发展史上具有重要意义外，还具有很多优点，如重现性好、分辨率与质量大小无关。但在目前出现的小型化质量分析器中，扇形磁场所占的比重不大，因为如果把磁场体积和重量降低将极大地影响磁场的强度，从而大大削弱其分析性能。 飞行时间质量分析器： 　 　与其他质量分析器相比，飞行时间质量分析器（即 TOF）具有结构简单、灵敏度高和质量范围宽等优点（因为大分子离子的速度慢，更易于测量）。在TOF中，不同质荷比的离子必须在同一时间点以相同的初动能进入漂移管，这样才能保证漂移时间与质量的平方根成反比。为保证不同质荷比的离子在同一时间点以相同初动能进入漂移管，常采用脉冲式离子源（如采用脉冲激光辐射的 MALDI 离子源），这样基本上可保证时间的一致性。 四极杆质量分析器： 　四极杆质量分析器的结构就是在相互垂直的两个平面上平行放置四根金属圆柱。如果把水平方向定义为 x方向，垂直方向为 y 方向，与金属圆柱平行的方向为 z 方向，在 x与 y 两支电极上分别施加±（UV cosωt）的高频电压（V 为电压幅值，U 为直流分量，ω为圆频率，t 为时间），则在四个金属圆柱之间的空间形成一个形如马鞍的交变电场。四极杆质量分析器能够通过电场的调节进行质量扫描或质量选择，质量分析器的尺寸能够做到很小，扫描速度快，无论是操作还是机械构造，均相对简单,但这种仪器的分辨率不高。 离子阱： 　　离子阱和四极杆质量分析器有很多相似之处，如果将四极杆质量分析器的两端加上适当的电场将其封上，则四极杆内的离子将受x，y，z 三个方向电场力的共同作用，使得离子能够在这三个力的共同作用下比较长时间地呆在稳定区域内，就象一个电场势阱，因此这样的器件被称为离子阱。所以，在很多时候都认为四极杆质量分析器与离子阱的区别就是前者是二维的，而后者是三维的。这种质量分析器价格相对低廉，体积较小，被广泛用做色谱检测器。在质谱仪器的小型化中，离子阱的小型化取得了十分注目的成果,有望在现场环境监测、国防、刑侦、安检、工业过程控制等领域发挥作用。 傅里叶变换离子回旋共振质量分析器： 　FT-ICR具有非常高的质量分辨率，能够检测大质量离子、进行离子的无损分析和多次测量，具有很高的灵敏度和级联质谱的能力，是一种在现代质谱学领域中具有重要用途的质量分析器。 为进一步提高质量分析器的质量分辨率，常见的措施是将扇形磁场和电场联用，形成双聚焦质量分析器，而 FT-ICR 的分辨率则可高达10的6次方以上。 Orbitrap: Orbitrap是2005年Finnigan公司新出的超高分辨质谱，它与原有的“超导磁铁傅立叶变换离子回旋共振质谱”（SC FT-ICR-MS，常说的FTMS）有类似的地方也有许多不同。Orbitrap相当于一台轻量级FTMS，它的维护简单，相当于TOF；指标方面略逊于FTMS，但是比一般质谱要好。 检测器： 　 电子倍增管： 单个电子倍增管基本上没有空间分辨能力，难以满足质谱学日益发展的需要。于是，人们就将电子倍增管微型化，集成为微型多通道板（MCP）检测器，并且在许多实际应用中发挥了重要作用。除了这种形式的阵列检测器外，电荷耦合器件（CCD）等在光谱学中广泛使用的检测器也在质谱仪器中获得了日益增多的应用。近年来，IPD（ion-to-photon）检测器由于它能够在高压下长时间稳定地工作，也引起了人们的极大重视。 离子计数器： 一般多用来进行离子源的校正或离子化效率的表征。对一般电子倍增管而言，一个离子能够在10的负7次方秒内引发10的5-8次方个电子，对绝大多数工作在有机物检测、生物化学研究领域的质谱仪器来说，其灵敏度已经足够。但在某些地球化学、宇宙学研究中，则需要用离子计数器来进行检测，其检测电流可以低于每秒钟一个离子的水平，一般离子源的信号至少也是离子