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毒理学基础实验课程教学大纲 课程名称：毒理学基础（Basic Toxicology） 课程编码：1322008217 课程类别：专业课 总学时数：68 实验时数：32 学 分：3.5 开课单位：公共卫生学院环境与职业卫生学教研室 适用专业：预防医学 适用对象：五年制本科 一、课程的性质、类型、目的和任务 毒理学是一门实验科学。体内试验是以实验动物为模型，最终目的是通过外源化学物对实验动物的毒性反应，向人外推，以期评估外源化学物对人的危害及危险性。体外试验主要用于筛选和预测急性毒性和机制研究；人体实验和流行病调查则可进一步深化和证实在动物实验中所得到的资料。 毒理学试验的目的通过对动物的实验观察和分析来研究各种外源化学物毒作用，获得毒物的毒性、剂量-反应关系，毒作用机制以及它们在机体内的生物转运和生物转化规律等方面的资料，因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。 其任务是通过对本课程的学习，使学生掌握毒理学动物实验的设计、实施、结果观察和评价等研究的基本功，为学习预防医学专业的其他学科奠定试验基础。 本课程适用于预防医学专业的本科学生。 二、本课程与其它课程的联系与分工 本课程宜从四年级第一学期开始，以确保学生学习本课程具有所需要的生物化学、医学科研方法学、统计学基础。 三、课程内容及教学基本要求 [1]表示“了解”；[2]表示“理解”或“熟悉”；[3]表示“掌握”； 实验一 毒理学实验设计与统计分析 毒理学实验设计的基本原则[3]；毒理学实验设计的步骤[3]；毒理学实验设计常用方法[3]；毒理学实验的质量控制[3]；计数资料[3]；计量资料[3]；根据所给案例设计毒理学实验[3]。 实验二 实验动物的一般操作技术 健康动物的选择[3]；实验动物的性别鉴定[3]；实验动物的抓取方法[3]；实验动物的编号、标记方法[3]；实验动物的随机分组方法[3]；实验动物的被毛去除方法[2]；实验动物染毒途径和方法[3]；实验动物生物材料采集和制备[2]；生理指标测量[2]； 实验三 经口急性毒性试验 LD50实验设计和评价方法[3]；不同途径的染毒方法[2]；各种LD50的计算方法[2]；急性毒性的分级标准[1]； 设计敌敌畏急性经口染毒LD50评价实验[1]。 实验四 化学物的遗传毒性检测（Ames试验） Ames试验的原理[3]； Ames试验用菌株特性及鉴定方法[2]； Ames试验方法（点试法和掺入法）[3]；试验结果的判定方法[1]； 实验五 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验 小鼠骨髓嗜多染红细胞（PCE）微核测定方法[3]；细胞染色体损伤情况[1]；掌握检测断裂剂和部分非整倍体致突变剂的测定方法[3]；制片和镜检操作[2]。 实验六 肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化脂质降解产物丙二醛含量检测 实验原理[4]；肝组织匀浆技术[3]；谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化脂质降解产物丙二醛的毒理学意义[2]。 实验七 哺乳动物细胞中DNA的提取 实验原理[3]；组织DNA提取的分子生物学技术[2]；DNA提取注意事项[2]；DNA提取技术应用[1]。 四、实验方式与要求 1．实验前学生必须进行预习，预习报告经教师批阅后，方可进入实验室进行实验。 2．进入实验室前，必须穿白大衣。 3．实验2人1组，在规定的时间内，由学生独立完成，出现问题，教师要引导学生独立分析、解决，不得包办代替。 4．任课教师要认真上好每一堂课，实验前清点学生人数，实验中按要求做好学生实验情况及结果记录，实验后认真填写实验开出记录。 五、进程安排表 序号 项目名称 主要仪器设备名称、台套数 实验学时 每组人数 实验类型 实验 要求 1 毒理学实验设计与统计分析 电脑（1），投影仪（1） 4 2 设计性 必做 2 实验动物的一般操作技术 动物体重秤（4）、温度计（8）、血红蛋白计（8） 4 2 综合性 必做 3 经口急性毒性试验（LD50） 大、小灌胃器材（各8个）、静式染毒柜（1）；电子天平（2）、动物体重秤（4） 10 2 设计性 必做 4 致突变实验-Ames试验 恒温水浴震荡培养箱（1）、干热灭菌箱（1）、干燥箱（1）、分析天平（1）、高压蒸汽消毒锅（1）、低温冰箱（1）、普通冰箱（1）、超净工作台（2）、可调加样器（8）、各种玻璃器材（8）。 2 2 设计性 必做 5 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验 载玻片（16）、染色缸（4）、显微镜（8）、细胞计数板（8）。 4 2 验证性 必做 6 肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化脂质降解产物丙二醛含量检测 722分光光度仪（2），电动匀浆器（2）。 4 2 验证性 必做 7 哺乳动物细胞中DNA的提取 722分光光度仪（2），电动匀浆器（2）。 4 2 验证性 选做 8 三段生殖毒性试验 电子秤（2），生物显微镜