高效液相色谱法测定氨基酸.pdfVIP

高效液相色谱法测定氨基酸 一实验目的 了解氨基酸的高效液相色谱分离分析方法; 学习高效液相色谱仪的使用方法。 蛋白质样品经酸或碱水解后再行用丹磺酰氯进行衍生 化作用溶解于流动相溶液， 用具有C8反相柱荧光检 测器的反相液相色谱进行测定，能很好地测定出各种 氨基酸的含量。 三、仪器与试剂 (一）仪器： 高效液相色谱仪仪 。 (二）试剂： 重蒸镏） 乙腈 （ ； 重蒸馏） 丙酮 （ ； 丹磺酰氯丙酮溶液：称取1.0克丹磺酰氯溶于10毫升丙 酮中。使用时吸取0.1毫升此溶液用 毫升丙酮制备而 8 成。贮存于冰箱中，工作液当天配制； 缓冲溶液 (pH=0.5 ) :称取 8.4 克碳酸氢钠溶解于 1000毫升水中，用0.5mol/L氢氧化钠调节溶液pH值 为10.5，过滤后使用; 0.5mol/L氢氧化钠溶液； 0.01mol/ L盐酸溶液及6mol/ L盐酸溶液； 6mol/ L氢氧化钡溶液；