2022年pet系统-原核表达详细总结.pptxVIP

PET原核表达系统pET系统是有史以来在E.coli中克隆表达重组蛋白的功能最强大的系统；目的基因被克隆到pET质粒载体上；受噬菌体T7强转录及翻译信号把握，表达由宿主细胞供应的T7RNA聚合酶诱导；T7RNA聚合酶机制特殊有效并具选择性：充分诱导时，几乎全部的细胞资源都用于表达目的蛋白；.***精品PPT资源防止被采集专用文字===》名师归纳总结=====》下载可删除===》欢迎各位下载 =====》 这是第1页***不依靠连接反应的克隆方法（LIC）用LIC法制备的pET载体有不互补的单链粘端，与目的插入片段上相应的粘端互补；扩增目的插入片段的引物5,端序列要与LIC载体互补；T4DNA聚合酶的3 , -5 , 外切酶活性经短时间即可在插入片段上形成单链粘端；由制备好的插入片段和载体相互形成退化产物，这种方法特殊快速高效且为定向克隆；pET载体上编码的氨基酸序列可通过肠激酶或X因子去掉；.***精品PPT资源防止被采集专用文字===》名师归纳总结=====》下载可删除===》欢迎各位下载 =====》 这是第2页***Function of T7 PolymeraseThe 3?5 exonuclease activity of T4 DNA polymerase removes nucleotides until it encounters a residue corresp