医院环境卫生监测方法和报告方式新进展详解演示文稿.pptVIP

四、使用中消毒液染菌量测定 1、消毒剂的采样和稀释 用无菌吸管或注射器按无菌操作方法吸取1.0mL被检消毒液，加入9mL含中和剂的各类稀释液 中和剂中所用PBS液为： 0.03mol/L的pH7.2~7.4磷酸盐缓冲液 (PBS)，配法见前。 2、中和剂的选择 ◆醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和； ◆含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒剂用含 0.1%硫代硫酸钠的PBS液中和； ◆洗必泰、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3%卵磷脂的PBS液中和； ◆醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸的PBS液中和； ◆含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中加入吐温80至3%（W/V)；也可使用该消毒剂消毒效果检测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。 当前30页，共43页，星期一。 3、检测方法 （采样后须4小时内外理完标本） 1、用无菌吸管吸取一定稀释比例（如1∶10)的中和后混合液1. mL加到无菌空平皿中，再将冷至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL～20mL，36℃±1℃恒温箱培养72h，计数菌落数；必要时分离致病性微生物，进行目标微生物的检测。 2、消毒液染菌量(cfu/ml)＝平均每皿菌落数×10 （1）计算菌落数为0时，报告为：无菌生长 （2）0＜计算菌落数≤100时，报告为：实际菌落数cfu/ml （3）计算菌落数＞100时，报告为：菌落数＞ 100cfu/ml 3、结果判断：使用中灭菌用消毒液：无菌生长；使用中皮肤黏膜消毒液染菌量：≤10cfu/mL，其它使用中消毒液染菌量≤100cfu/mL。 注：填写报告单结果时应注明“合格”或”不合格“，或附上相应项目的标准要求参考值 当前31页，共43页，星期一。 医院环境卫生监测方法和报告方式新进展详解演示文稿 当前1页，共43页，星期一。 （优选）医院环境卫生监测方法和报告方式新进展 当前2页，共43页，星期一。 环境类别 范 围 细菌数量标准 空气 物体表面 cfu/cm2 医护人员手 cfu/cm2 Ⅰ类 层流洁净手术室，层流洁净病房。 ≤4 cfu/φ9cm平皿·30min ≤5 ≤5 Ⅱ类 非洁净（普通）手术室；产房；导管室；血液病病区、烧伤病区等保护性隔离病区；重症监护病区；新生儿室等。 ≤4 cfu/φ9cm平皿·15min ≤5 ≤5 Ⅲ类 母婴同室；消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区；血液透析中心（室）；其他普通住院病区等。 ≤4 cfu/φ9cm平皿·5min ≤10 ≤10 Ⅳ类 普通门（急）诊及其检查、治疗（注射、换药等）室；感染性疾病科门诊和病区。 ≤4 cfu/φ9cm平皿·5min ≤10 ≤10 当前3页，共43页，星期一。 一、物体表面消毒效果的监测 采样时间: 在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样 。 采样方法: 用5cm×5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。 剪去或用酒精灯烧去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml无菌检验用生理盐水洗脱液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体表面采样。采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。 当前4页，共43页，星期一。 病房电脑键盘的细菌 江西省肿瘤医院微生物室 当前5页，共43页，星期一。 上海中山医院ICU病房 当前6页，共43页，星期一。 检测方法: 充分振荡采样管后，取不同稀释倍数的洗脱液1. ml接种营养琼平皿，将冷至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL～20mL，35℃±1℃恒温箱培养48h，计数菌落数。怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测，加种羊血哥仑比亚琼脂平皿和麦康凯平皿等。 结果计算: 物体表面菌落总数（cfu/cm2） = （平皿菌落数×10）÷100 =平皿菌落数÷10 或 = （平皿菌落数×10）÷实际采样面积 0≤计算的数值＜1 时， 报告为：物表细菌菌落数 ＜1 cfu/cm2 1 ≤计算的数值≤10时， 报告为：物表细菌菌落数： 实际计算值 cfu/cm2 计算的数值 ＞10时，报告为: 物表细菌菌落数＞10 cfu/cm2 如是灭菌物品物表无细菌生长时，则报告：无菌生长 小型物体表面的结果计算，用