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基因工程及其应用;2;1、概念:又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗说,就是按照大家意愿,把一个生物某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一个生物细胞里,定向地改造生物遗传性状。;;①不能转录为信使RNA,不能
编码蛋白质。;;真核细胞 基因结构;;
(1)20世纪40年代,Avery 经过 肺炎双球菌体外转化试验,确定了生物遗传物质化学本质是DNA;
(2)19世纪50年代James D. Watson和Francis H. C. Crick揭示了DNA分子双螺旋结构和半保留复制机制,处理了基因自我复制和传递问题。;(3) 1958年Crick又提出了遗传信息传递“中心法则”; 1964年Marshall Nirenberg和Gobind Khorana等破译了64个遗传密码,从而说明了遗传信息流向和表示问题;1.基因拼接
(1)DNA基础组成单位都是四种脱氧核苷酸。
(2)双链DNA分子空间结构都是规则双螺旋结构。碱基互补配对标准;2.外源基因在受体内表示
(1)基因是控制生物性状独立遗传单位。
(2)遗传信息传递都遵照中心法则阐述信息流动方向。
(3)生物界共用一套遗传密码。;二、基因工程操作工具; 被同一个限制酶切断几个DNA是否含有相同黏性末端?;GAATTCCGTAGAATTCGGATT ;2、基因针线──DNA连接酶;基因针线:DNA连接酶;; 三、基因工程基础操作程序;(一)目标基因获取;a、DNA变性(90℃-95℃):双链DNA模板
在热作用下,_____断裂,形成___________;反转录法:
以目标基因转录成信使RNA为模板,反转录成互补单链DNA,然后在酶作用下合成双链DNA,从而取得所需基因。;1.用一定_________切割
质粒,使其出现一个切
口,露出____________。
2.用_____________切断目
基因,使其产生_____
____________。;方法;;;;;; 目标基因插入Ti质粒T-DNA上 农杆菌
导入植物细胞 整合到受体细胞染色体上
目标基因遗传特征得以维持稳定和表示;花粉管通道法;2.微生物作受体细胞原因:;33;基因工程应用;一、植物基因工程硕果累累;经典例子:转基因抗虫棉——Bt毒蛋白基因;经典例子:抗烟草花叶病毒转基因烟草、
抗病毒转基因小麦、甜椒;3.抗逆转基因植物;4.利用转基因改良植物品质;富含赖氨酸转基因玉米;41;二、动物基因工程前景辽阔;1.用于提升动物生长速度;3.用转基因动物生产药品(重点);过程:
1、重组药用蛋白基因与乳腺蛋白基因开启子
2、用显微注射法导入到受精卵
3、将受精卵送入母体生长发育
4、转基因动物进入泌乳期后,提取乳汁;在传统药品生产中,一些药品如胰岛素、干扰素直接生物体哪些结构中提取?
药品直接从生物组织、细胞或血液中提取。
传统生产方法缺点
因为受原料起源限制,价格十分昂贵。
可利用什么方法来处理上述问题?
利用基因工程方法高效率地生产出各种高质量、低成本药品。;基因工程药品 —— 胰岛素(糖尿病);四、基因治疗曙光初照—早期临床阶段
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