实验二细菌的革兰氏染色及芽孢染色法.pptxVIP

实验二细菌的革兰氏染色 及芽孢染色法 ;细菌 个体微小 半透明;(一)实验目的:;革兰氏染色法:是1884年由丹麦病理学家所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G—)两大类,该染色法因此能将细菌分为G+菌和G—菌,是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。 ;革兰阳性菌细胞壁的化学组成;革兰阴性菌细胞壁的化学组成;G+菌细胞壁较厚,肽聚糖含量较高,网格结构紧密,含脂量低,当被酒精脱色时,引起了细胞壁肽聚糖层网状结构的孔径缩小以至关闭,从而阻止了不溶性结晶紫-碘复合物的逸出,依然原来的颜色。 Gˉ肽聚糖层较薄,交联度低,含较多类脂质,故用乙醇处理后,类脂质被溶解,细胞壁孔径变大,通透性增加,使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出,细胞被脱色,经沙黄复染呈红色。; 芽孢(内生孢子)及其研究芽孢的重要性 芽孢是某些G+菌形成的圆形或椭圆形的休眠体,抗热性和折光性较强。 芽孢的大小、形态、位置可做分类依据。 ;中央芽孢;(二)实验原理——芽孢染色法原理; 1、活材料: 革兰氏染色:培养12h-16h枯草杆菌(Bacillus subtilis)和培养24h大肠杆菌(Escherichia coli) 芽孢染色:培养28-36 小时 的蜡状芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis) 2、染色液和试剂: 革兰氏染色染色液:结晶紫