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保健功能评价方法--抗氧化功能评价方法 附件 1 ： 抗氧化功能评价方法 试验项 目、试验原则及结果判定 Items, Principles and Result Assessment 1 试验项 目 1.1 动物实验 1.1.1 体重 1.1.2 脂质氧化产物：丙二醛或血清8- 氢氧异前列腺素（8-Isoprostane） 1.1.3 蛋白质氧化产物：蛋白质羰基 1.1.4 抗氧化酶 ：超氧化物歧化酶或谷胱甘肽过氧化物酶 1.1.5 抗氧化物质 ：还原性谷胱甘肽 1.2 人体试食试验 1.2.1 脂质氧化产物：丙二醛或血清8- 氢氧异前列腺素（8-Isoprostane） 1.2.2 超氧化物歧化酶 1.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶 2 试验原则 2.1 动物实验和人体试食试验所列的指标均为必测项 目。 2.2 脂质氧化产物指标 中丙二醛和血清8- 氢氧异前列腺素任选其一进行指标测定，动物实 验抗氧化酶指标 中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶任选其一进行指标测定。 2.3 氧化损伤模型动物和老龄动物任选其一进行生化指标测定。 2.4 在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的 察。 3 结果判定 3.1 动物实验 ：脂质氧化产物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶、抗氧化物质 四项指标 中三项阳 性，可判定该受试样品抗氧化功能动物实验结果阳性。 3.2 人体试食试验 ：脂质氧化产物、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项指标 中二项 阳性，且对机体健康无影响，可判定该受试样品具有抗氧化功能的作用。 1 1 / 22 保健功能评价方法--抗氧化功能评价方法 抗氧化功能检验方法 Method for the Assessment of Antioxidative Function 1 动物实验 1.1 实验动物 选用10 月龄以上老龄大鼠或8 月龄以上老龄小鼠，也可用氧化损伤模型鼠。单一性别， 小鼠每组10－15 只，大鼠8 －12 只。 1.2 剂量分组及受试样品给予时间 实验设三个剂量组和一个溶剂对照组，以人体推荐量的10 倍（小鼠）或5 倍（大鼠） 为其中的一个剂量组，另设两个剂量组，高剂量一般不超过30 倍，必要时设阳性对照组、 空白对照组。受试样品给予时间30 天，必要时可延长至45 天。 1.3 实验方法 1.3.1 老龄动物 选用10 月龄以上大鼠或8 月龄以上小鼠，按血中MDA 水平分组，随机分为1 个溶剂 对照组和3 个受试样品剂量组。3 个剂量组给予不同浓度受试样品，对照组给予同体积溶剂， 实验结束时处死动物测脂质氧化产物含量、蛋白质羰基含量、还原性谷胱甘肽含量、抗氧化 酶活力。 1.3.2 D－半乳糖氧化损伤模型 1.3.2.1 原理 D-半乳糖供给过量，超常产生活性氧，打破了受控于遗传模式的活性氧产生与消除的 平衡状态，引起过氧化效应。 1.3.2.2 造模方法 选 25-30g 健康成年小鼠，除空白对照组外，其余动物用D-半乳糖40mg －1.2g/kg BW 颈背部皮下注射或腹腔注射造模，注射量为0.1mL/10g，每日1 次，连续造模6 周，取血测 MDA，按MDA 水平分组。随机分为1 个模型对照组和3 个受试样品剂量组，3 个剂量组经 口给予不同浓度受试样品，模型对照组给予同体积溶剂，在给受试样品的同时，模型对照组 和各剂量组继续给予相同剂量 D-半乳糖颈背部皮下或腹腔注射，实验结束处死动物测脂质 氧化产物含量、蛋白质羰基含量、还原性谷胱甘肽含量、抗氧化酶活力。 1.3.3 乙醇氧化损伤模型 1.3.3.1 原理 2 2 / 22 保健功能评价方法--抗氧化功能评价方法 乙醇大量摄入，激活氧分子产生自由基，导致组织细胞过氧化效应及体内还原性谷胱 甘肽的耗竭。 1.3.3.2 造模方法