王镜岩高级生化RNA的生物合成和加工.pptVIP

由hnRNA转变为 mRNA包括： （1）5’端形成帽子结构；（稳定作用） （2）在链的3’端切断并加上多聚A尾；（防止酶的降解作用） （3）剪去内含子转录而来的序列，并连接外显子； （4）链内部核苷的甲基化。 第三十一页，共四十页。 第三十二页，共四十页。 第三十三页，共四十页。 三 在RNA指导下的RNA和DNA的合成 第三十四页，共四十页。 三 在RNA指导下的RNA和DNA的合成 （一）以RNA为模板合成RNA：RNA复制 RNA病毒的自身复制过程 （二）以RNA为模板合成DNA：逆转录 关于逆转录酶的性质： 1、RNA指导的DNA聚合酶活力 2、DNA指导的DNA聚合酶活力 3、核糖核酸酶H活力：专门水解RNA-DNA杂合分子中的RNA 第三十五页，共四十页。 本章提要 1、DNA指导下的RNA的生物合成 即转录：以DNA为模板合成RNA 2、RNA的转录后加工 通过一系列加工和修饰过程成为成熟的，具有功能的RNA分子的过程。 3、RNA指导下的RNA和DNA合成 即RNA复制和逆转录 第一页，共四十页。 一、DNA指导下的RNA合成（转录） 1、DNA指导下的RNA聚合酶 2、启动子和转录因子 3、终止子和终止因子 4、转录的调节控制 5、RNA生物合成的抑制剂 第二页，共四十页。 转录单位 1、RNA转录起始于DNA模板一个特定起点，并在另一个终点终止，此转录区域为转录单位。 2、一个转录单位可是多基因，也可是单基因。 3、转录起始由启动子控制，终止由终止子控制，转录通过DNA指导由RNA聚合酶实现。 第三页，共四十页。 （一）DNA指导的RNA聚合酶 1、由RNA聚合酶催化的反应 NTP＋(NMP)n RNA聚合酶 (NMP)n+1 + PPi RNA 延伸的RNA 2、DNA是RNA合成的模板 （1）用于转录的那条DNA链为模板链，或称负链；对应的链为编码链，即正链；转录方向为5’?3’。 （2）转录过程中形成局部DNA-RNA杂交分子，转录后DNA重新形成双螺旋。 Mg2+ 第四页，共四十页。 转录方向为5’?3’ 第五页，共四十页。 3、RNA聚合酶有多种亚基，每种亚基具有特定功能 原核生物RNA聚合酶 举例：原核生物RNA聚合酶各亚基性质与功能 （1） 原核生物中由一种RNA聚合酶催化所有RNA的合成 （2）RNA聚合酶全酶由核心酶(?2、?、?’ 亚基)和??亚基组成，还有?与两个Zn原子 （3）核心酶(?2、?、?’ 亚基)只能延长RNA链，不具起始合成能力；不同细菌?亚基不同；?亚基在决定RNA聚合酶起始转录中起关键作用 第六页，共四十页。 大肠杆菌RNA聚合酶 第七页，共四十页。 大肠杆菌RNA聚合酶与DNA的相互作用及RNA聚合酶催化的转录过程（1）识别阶段：RNA聚合酶在?亚基引导下结合于DNA启动子（2）起始阶段：DNA双螺旋局部解开（3）延伸阶段：核心酶向前移动， ?亚基脱落；RNA不断合成（4）终止阶段（5）RNA和RNA聚合酶从DNA上脱落 转录泡 第八页，共四十页。 真核RNA聚合酶 1、RNA聚合酶I：转录45S rRNA前体，加工形成5.8S rRNA，18 S rRNA，28S rRNA 2、RNA聚合酶II：转录编码蛋白质的基因和大多核内小RNA的基因 3、RNA聚合酶III：转录小RNA的基因： 5S rRNA，tRNA等 第九页，共四十页。 （二）启动子和转录因子 1、启动子(Promoter) ：DNA上与转录起始相关，RNA聚合酶与之专一结合并起始转录的核苷酸顺序。研究方法：footprint 2、转录因子：RNA酶转录需一系列蛋白因子帮助，其作用或是识别DNA上的作用位点，或是识别其它因子，或是识别RNA聚合酶。 名词：startpoint,upstream,downstream 第十页，共四十页。 原核生物启动子结构 1、?亚基能直接和启动子的上面两序列相互作用； 2、两序列位于DNA双螺旋同一侧； 3、其间距离改变将影响?因子的作用力而改变 转录起始效率（强启动子，弱启动子）。 启动子上的两个保守顺序 -10 区(Pribnow 框) 5’ TATAAT 3’ -35 区 5’ TTGACA 3’ 第十一页，共四十页。 真核生物的启动子 1、三类启动子：分别由RNA聚合酶I、II、III转录。 2、真核生物启动子由转录因子而