荧光定量PCR引物设计软件说明书(PrimerExpress_guide).docxVIP

2022年-2023年Primer Express Operation Guide 2022年-2023年 Primer Express Operation Guide Primer Express v3.0 Primers and Probe Design For Real-Time PCR Primers/Probes Design Primers/Probes Design Guideline TaqMan Probe Primer Probe Primer 離, PCR 50-150 bp G/C % 30-80 % 列 4 G Tm : 68-70 (Quantification assay) 65-67 (Allelic Discrimination assay) Probe 度: 13~25 bases (TaqMan MGB probe) 13~30 bases (TaqMan probe) 連 6 A 列 5’列不 G ( FAM-dye 5’列不 G) CGstrandprobe b 3’ 4 列裡 3 G (GGG-MGB-3’ or GGAG-MGB-3’) a probe 2 CC di-nucleotides a a: TaqMan MGB probe Tm : 58-60 Primer 度: 20 bases (Optimal