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会计学 1 基本原理与主要分离类型 2022-5-13 基本原理： 流动相中的溶质分子（X）与溶剂分子（S）在固定相吸附剂上的竞争吸附： Xm + nSa = Xa + nSm 下标m、a分别表示流动相和固定相，n是被吸附的溶剂分子数。达到吸附平衡时，吸附平衡常数（K）可表示为： K分配系数，但K值大，表明该溶质分子在固定相上被吸附得多，吸附作用强，该组分的保留时间长，分配系数也大。吸附平衡常数K可以由吸附等温线数据求出。 第1页/共20页 2022-5-13 等温吸附线与色谱峰形： 拖尾峰(凸形等温吸附线)： 被吸附分子首先占据强吸附力的点。低浓度时，主要被强吸附力的点吸附，保留时间长。 浓度高时，较多溶质分子被吸附力弱的点吸附，造成色谱峰中心部分运动速率较快，峰前移，而后沿部分吸附力相对较强，运动速率较慢，形成拖尾峰。 液-固吸附分离模式适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有官能团的化合物和异构体有较高选择性。 第2页/共20页 2022-5-13 4.4.2 液-液分配色谱 固定相与流动相互不相溶。 基本原理：组分在固定相和流动相上的分配。 流动相：亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定液的极性(正相 normal phase)，反之流动相的极性大于固定液的极性(反相 reverse phase)。正相与反相的出峰顺序相反。 固定相：早期涂渍固定液，现已不采用。 化学键合固定相：将基团通过化学反应键合到硅胶（担体）表面的游离羟基上，如C18柱（反相柱）。 第3页/共20页 2022-5-13 分析实例： 第4页/共20页 2022-5-13 4.4.3 离子交换色谱 固定相：阴离子交换树脂或阳离子离子交换树脂。 流动相：阴离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液；阳离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶液。 第5页/共20页 2022-5-13 离子交换基本原理 组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。亲和力大，保留时间长。 阳离子交换：R—SO3H + M+ = R—SO3 M + H + 阴离子交换：R—NR4OH +X- = R—NR4 X + OH- 第6页/共20页 2022-5-13 基本原理 平衡时，平衡常数为 对于磺酸型阳离子交换树脂，一价阳离子的KB/A值顺序： Cs+Rb+ K+NH4+ Na+H+Li+ 二价阳离子的KB/A值顺序： Ba2+Pb2+ Sr2+Ca2+ Cd2+Cu2+ 对于季胺型阴离子交换树脂，一价阴离子的KB/A值顺序： ClO4- I- HSO4- SCN- NO3- Br- NO2- CN- Cl- BrO3- OH- HCO3- H2PO4- IO3- CH3COO- F- 第7页/共20页 2022-5-13 离子交换分离实例 第8页/共20页 2022-5-13 4.4.4 离子色谱 ion chromatography 离子色谱是在20世纪70年代中期发展起来的一种技术，其与离子交换色谱的区别是其采用了特制的、具有极低交换容量的离子交换树脂作为柱填料，并采用淋洗液抑制技术和电导检测器，是测定混合阴离子的有效方法。 有关内容将在本章第五节中讲授。 第9页/共20页 2022-5-13 4.4.5 离子对色谱 ion pair chromatography 将一种(或多种)与溶质离子电荷相反的离子(对离子或反离子)，加到流动相中与溶质离子结合形成疏水性离子对，能够在两相之间进行分配。 阴离子分离：对离子常用烷基铵类，如氢氧化十六烷基三甲胺。 阳离子分离：对离子常用烷基磺酸(己烷磺酸钠)。 反相离子对色谱：非极性的疏水固定相(C18柱)，含有对离子Y+的甲醇-水或乙腈-水作为流动相，试样离子X-进入流动相后，生成疏水性离子对Y+X-。 第10页/共20页 2022-5-13 基本原理： 形成的离子对化合物X+Y-，在两相间进行分配： X+水相 + Y-水相 = X+Y-有机相 平衡常数： 溶质在两相间的分配系数DX为： 不同待测离子与反离子形成离子对的能力不同，分配系数存在差异，导致在固定相中滞留时间不同，从而实现色谱分离。 第11页/共20页 2022-5-13