蛋白质工程及应用.ppt

第三章 蛋白质工程及其在食品工业中的应用;概述 ;酶.几乎全都是蛋白质。 肌肉收缩、精子移动、细胞分裂过程中的染色体移动. 高等生物的有序生长和分化过程。 抗体蛋白能识别和结合特异性的外源物质，使人体具备抵抗各种细菌、真菌和病毒的能力。 由神经细胞膜蛋白构成的离子通道，负责神经冲动的形成和传导。 血红蛋白具有结合和释放氧的能力，是血液中氧、二氧化碳和氢离子的携带者。 另外，人体的毛发和指甲属于角蛋白，而血栓是由血纤蛋白单体聚合而成的。;蛋白质的生物学功能; 蛋白质是生命的体现者，离开了蛋白质，生命将不复存在。可是，生物体内存在的天然蛋白质，有的往往不尽人意，需要进行改造。 由于蛋白质是由许多氨基酸按一定顺序连接而成的，每一种蛋白质有自己独特的氨基酸顺序，所以改变其中关键的氨基酸就能改变蛋白质的性质。而氨基酸是由三联体密码决定的，只要改变构成遗传密码的一个或两个碱基就能达到改造蛋白质的目的。 蛋白质工程的一个重要途径就是根据人们的需要，对负责编码某种蛋白质的基因重新进行设计，使合成的蛋白质变得更符合人类的需要。;蛋白质工程就是以蛋白质的结构与功能为基础，利用基因工程的手段，按照人类自身的需要，定向地改造天然的蛋白质，甚至创造新的、自然界本不存在的、具有优良特性的蛋白质分子。 ;具体地说，蛋白质工程就是通过对蛋白质已知结构和功能的了解，借助计算机辅助设计，利用基因定点诱变等技术，特异性地对蛋白质结构基因进行改造，借以改善蛋白质的物理和化学性质（热稳定性、酶的专一性）， 或利用化学和物理手段，对目标基因按预期设计进行修饰和改造，合成新的蛋白质。并由此深入研究蛋白质的结构与功能的关系。 ;三个步骤： 1、获得目的蛋白质晶体，并利用X射线技术通过晶体衍射仪收集衍射数据，然后对晶体进行测量、分析，确定蛋白质的空间结构。 2、借助计算机对蛋白质进行饰变，通过建立数据库和人工智能等途径确定蛋白质结构和功能的关系确定需要修饰的位点。;三个步骤： 3、运用定点突变技术等一系列基因操作技术??段来改变编码蛋白质的基因，从而实现对蛋白质的改变。 对已经存在的蛋白质“下手”，从结构测定入手。 创造全新的蛋白质，要根据已有的蛋白质结构和功能的信息资料进行分子设计------基因表达-------对表达产物的结构和功能进行检测、分析。 必经之路：（饰变、分析、检测、修改）*N ; 蛋白质工程是在深入理解目标蛋白质的“结构-功能 ”关系的基础上，进行严格的分子设计，定向改造一个预期的新特性的蛋白质。 一般的两种情况： 对天然的蛋白质进行改造。（已有的蛋白质） 完全重建一个自然界原来没有的蛋白质。（全新的） 对天然的蛋白质操作有： 少数几个AA残疾进行替换（小改） 分子剪裁（中改） 局部重建（大改） ; 重建一个自然界原来没有的蛋白质： 从头设计一个全新的蛋白质 目前，蛋白质工程主要进行的是中改、小改。 “大改”和“从头设计”，要求必须全面掌握蛋白质一级结构决定高级结构的规律，掌握高级结构与功能的相关性。 现存的蛋白质数据库还满足不了对蛋白质空间结构的研究 ;实例1：玉米中赖氨酸的含量比较低; 人类蛋白质组计划是继人类基因组计划之后，生命科学乃至自然科学领域一项重大的科学命题。2001年，国际人类蛋白质组组织宣告成立。之后，该组织正式提出启动了两项重大国际合作行动：一项是由中国科学家牵头执行的“人类肝脏蛋白质组计划”；另一项是以美国科学家牵头执行的“人类血浆蛋白质组计划”，由此拉开了人类蛋白质组计划的帷幕。;“人类肝脏蛋白质组计划”是国际上第一个人类组织／器官的蛋白质组计划，由我国贺福初院士牵头，这是中国科学家第一次领衔的重大国际科研协作计划，总部设在北京，目前有16个国家和地区的80多个实验室报名参加。它的科学目标是揭示并确认肝脏的蛋白质，为重大肝病预防、诊断、治疗和新药研发的突破提供重要的科学基础。 人类蛋白质组计划的深入研究将是对蛋白质工程的有力推动和理论支持。 ;思考：对天然蛋白质进行改造，你认为应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？;二、蛋白质工程的基本原理;中心法则 （central dogma）;; 复制：是亲代双链DNA按碱基配对原则，准确形成两个相同核苷酸序列的子代DNA分子的过程。两条DNA链都可作为复制的模板。 转录：是以一条DNA链为模板，将DNA链上储存的遗传信息按碱基配对原则准确转换成互补的mRNA的过程。 翻译：是以mRNA为模板，将mRNA上的遗传信息转换成蛋白质的氨基酸序列的过程。 中心法则：遗传信息由DNA mRNA 蛋白质的流动途径。 ;;３、