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- 2022-05-27 发布于广东
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用心 爱心 专心
实验十一 DNA的粗提取与鉴定
教学目的
初步掌握DNA粗提取和鉴定的方法。
观察提取出来的DNA物质。
实验原理
DNA在NaCl溶液中的溶解度是随NaCl的浓度变化而改变的。DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低,据此可使溶解于NaCl溶液中的DNA析出。
DNA不溶于酒精溶液,但细胞中某些物质可以溶于酒精溶液,据此可提取杂质较少的DNA。
DNA+二苯胺蓝色(用于DNA的鉴定)
实验步骤
1.材料制备
0.1G/ml柠檬酸钠100ml
500ml烧杯→玻璃棒搅拌→1000r/min离心2min→吸去上清液→
活鸡血180ml
即得鸡血细胞液(也可将上述烧杯置于冰箱中,静置一天使鸡血细胞自行沉淀)
2.方法步骤
取血细胞液5-10ml+20ml蒸馏水,玻璃棒沿一个方向快速搅拌
(1)提取血细胞核物质 纱布过滤,滤液中含DNA和其他核物质,如蛋白质
原理:血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破,玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂
(2)溶解核内DNA:滤液+2mol/LNaCl溶液40ml,玻璃棒沿一个方向搅拌
(3)析出含DNA的粘稠物:向上述溶液中缓
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