植物愈伤组织的诱导、形成和形态建成影响因素-1.pptxVIP

植物愈伤组织的诱导、形成和形态建成的影响因素;第一节 愈伤组织的诱导和形成;第一节 愈伤组织的诱导和形成;愈伤组织 是在离体培养条件下，经植物细胞脱分化和不断增殖所形成的无特定结构的组织 。经一段时间的生长和增殖以后，在其内部出现一定程度的分化，产生出一些具有分生组织结构的细胞团、色素细胞或管状分子。在离体条件下，植物细胞全能性的表达，是使细胞发生分裂形成愈伤组织而实现的。;;;; **诱导期长短因植物种类、外植体的生理状态和外部因素而异，即使同一种物??不同基因型同一外植体的愈伤组织诱导期也不同。 **如有的植物愈伤组织诱导期只有1天（菊芋），而有的植物诱导期需要几天（胡萝卜），而刚收获得菊芋块茎诱导期只要22h，经贮藏5个月后，其诱导期延长到2天。; **愈伤组织进入分裂期时，外植体的脱分化因植物种类、基因型、外植体种类和生理状况而有很大差异。 **如烟草、胡萝卜等脱分化很容易，而禾谷类的脱分化较前者难；花器官脱分化较易，而茎叶则较难；幼茎组织脱分化较易，而成熟的老组织较难。;**愈伤组织在分裂期会出现导管细胞，筛管细胞，分泌细胞，毛状体细胞及木栓细胞等，并出现由小而密集的分裂细胞构成的细胞团，称为拟分生组织。 **这些区域化的细胞团往往在以后分化中称为形成芽原基及根原基的中心，愈伤组织也经常呈颗粒状的外形，这些颗粒中含有韧皮部、木质部和形成层组织，这种具有类似微管组织的愈伤组织颗粒也具有分化形成不定芽和不定根的能力。;愈伤组织诱导形成过程;愈伤组织颜色 Callus无任何形态结构，新鲜愈伤组织颜色为奶黄色或白色有光泽，少数也有淡绿色或绿色；老化的愈伤组织则转变为黄色至褐色。 愈伤组织保持时间 已诱导并建立起来的愈伤组织可以长期保存，如有报道大豆细胞系的愈伤组织在24℃和弱光下已保持15年。 愈伤组织生长周期 愈伤组织生长周期为2－3周。一般2－3周继代一次。 继代时应注意愈伤组织分割。 继代时间与植株再生能力及变异 以往研究认为继代时间长再生能力减弱甚至丧失，但目前多数研究认为长期继代培养的愈伤组织仍有再生能力。 继代时间与变异 ;愈伤组织在培养基上保持的时间 愈伤组织经长期继代培养，大多数物种基因型的愈伤组织再生能力降低，且受遗传因素控制，依不同基因型而异，但也有例外，有的基因型的植株再生往往在愈伤组织经多次继代后而产生 ;**愈伤组织遗传上的不稳定性因基因型、外植体、培养基成分和培养时间而异。 **同基因型的同一种外植体在不同培养基上会产生不同的变异。 **组织培养中涉及到的遗传变异主要是细胞核组成的改变，变异是不可逆的，这种遗传上的改变可以是染色体畸变，细胞核破碎，或者是由于细胞内复制引起的多倍性以及分子水平上的改变等形式。 **培养基成分，特别是外源激素的成分与变异的产生密切有关。 ;第二节 愈伤组织形态建成 ;形态建成方式;无根苗;Development of organs(roots, shoots, etc.) or embryos (embryo-like structures);二、具形态建成和不具形态建成能力的愈伤组织;三 Callus诱导、增殖及形态建成调控 ;1 基因型—重要影响因素; 不同外植体胚性愈伤组织发生 ;;2 外植体 ①一般而言，分化水平较低的薄壁细胞和处于分裂的分生组织细胞较易诱导出愈伤组织。薄壁细胞分化水平较低，有较大发育的可塑性，其进行分裂的潜力可保持很多年，如25年树龄的椴属茎的薄壁细胞还可以诱导形成愈伤组织。 ②分生组织细胞分裂潜能强，细胞分裂是脱分化形成愈伤组织的前提，因此是诱导愈伤组织适合的外植体。 ; 外植体的生理年龄也影响愈伤组织器官发生的能力，如油菜植株的茎段自下而上进行培养的效果不同，下部器官形成率较低，而上部形成愈伤组织的苗分化率则较高（下表） ;表4 油菜茎的不同节位与苗分化的关系（品种23）;外植体苗龄对蚕豆愈伤组织诱导的影响;;4、培养基类型 依培养基配方中含盐量多少可将目前培养基分为4类： **含盐量较大的培养基，如Murashige and Skoog于1962年设计的MS培养基以及改良的MS培养基，这类培养基含较高浓度的硝酸盐、铵盐和钾盐，微量元素非常全，此外LS（Linsmaier and Skoog, 1965）、BL(Brown and Lawrence, 1968)、ER(Eriksson, 1965)培养基也属于这类培养基。 **硝酸钾含量较高的培养基，如B5（Gamborg等，1968）、N6（朱至清等，1975）、SH（Schenk 和 Hildebrandt，1972），