west-blotting试剂和详细操作步骤.docxVIP

Western印迹法 这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体，并以针对特定氨基酸序列 的特异性试剂作为探针检测之。Western使用的探针是抗体，它与附着于固相支持体的靶蛋 白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混 合物中的某些特异蛋白进行鉴别和鉴定。 仪器：高压锅、玻璃匀浆器、高速离心机、分光光度仪、—20℃低温冰箱、垂直板电泳转 移装置、恒温水浴摇床、多用脱色摇床。 试剂：单去污剂裂解液、0.01mol/L PBS (pH7.3)、10%分离胶、4%浓缩校、G250考马斯亮 蓝溶液、0.15mol/L NaCl溶液、2X (5X) SD