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会计学;一、病原菌检测
(一)标本采集与运送原则
早期采集、无菌采集
合适标本、尽快送检、做好标记
(二)细菌分离培养与鉴定
1.分离培养(注意选择好培养基、
培养条件)
2.形态学检查
3.生化试验
4.血清学试验
5.动物试验
6.药物敏感试验:MIC、MBC;(三)病原菌抗原的检测
EIA、IF、协同凝集试验、CIE、
Western blot ;Western blot;(四)、分子生物学检测
核酸杂交
DNA可进行变性、复性、杂交。我们利用这一特性,制备特定序列DNA片段,进行标记后用作探针,在一定条件下,按照碱基互补配对原则与标本中已变性的细菌DNA进行杂交,通过检测杂交信号确定是否发生杂交反应,从而鉴定标本中有无相应的病原菌基因。;1. 探针的种类
(1)全染色体DNA探针
(2)染色体克隆片段DNA探针
(3)质粒DNA探针
(4)rRNA基因探针
(5)寡核苷酸探针
探针的特异性
探针的标记;核酸杂交类型:
固相杂交:
斑点杂交、原位杂交 Southern印迹、
Northern印迹
液相杂交:
;核酸杂交在临床细菌检测中的应用
(1)细菌分类鉴定
(2)细菌快速鉴定
(3)细菌耐药性的检测
(4)细菌毒素的检测
(5)细菌流行病学调查;聚合酶链反应
( polymerase chainreaction,PCR )
1. 特异性DNA体外扩增技术
2. 特异、灵敏、快速、操作简便
3. 广泛应用于细菌的鉴定;PCR在临床细菌检测中的应用
1. 细菌的快速检测
2. 细菌毒素的检测
3. 细菌耐药性的检测
4. 细菌流行病学调查 ;生物芯片技术
1. 通过微加工技术和微电子技术在固体芯片表面构建微型生物化学分析系统。
2. 对细胞、蛋白质、DNA以及其他生物组分的准确、快速、大信息量的检测。
3. 常用的生物芯片分为二大类:即基因芯片和蛋白芯片。;(五)、血清学诊断
用已知细菌或特异性抗原检测血清中的抗体。
若恢复期或一周后血清抗体效价比早期升高4倍或4倍以上,有诊断意义。
凝集试验、补体结合试验、中和试验、ELISA等;第二节 细菌感染的特异性预防;二、人工被动免疫
抗毒素
血清丙种球蛋白
其他免疫制剂:IFN-γ,CSF等。
;思考题
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