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以芦丁标准溶液为标准,测定玉米须中的黄酮得率,加5%NaNO2溶液,再加入10%Al(NO3)3溶液,用4%NaOH溶液,在碱性条件下黄酮与铝盐构成络合物,在可见光区测得固定的最大吸收峰,吸光度值与黄酮浓度遵循朗伯—比尔定律。
1.2.4.4 测定波长的选择
准确吸取1.00mL的芦丁标准液于25mL的比色管中,加入5%NaNO2溶液1.00mL,摇匀,放置6min;再加入10%Al(NO3)3溶液1.00ml,摇匀,静置6min;再加4%NaOH溶液10.00mL,再加70%的乙醇溶液定容至25mL刻度线处,摇匀,放置10min。以空白试剂为参比液,在440~560nm之间以10nm为间隔测定其吸光度,用描点的方法确定最大吸收波长;再用上述方法测定玉米须提取液的吸光度随波长变化的值,确定其最大吸收波长,以后要测的吸光度值就在此波长下测得。
1.2.4.5 标准曲线的绘制
准确吸取上述芦丁标准液0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL、3.00mL分别置于25mL比色管中,首先各加入5%NaNO2溶液1.00mL,混匀后,静置6min;然后加10%的Al(NO3)3溶液1.00mL,摇匀后静置6min;加4%NaOH溶液10.00mL,用70%的乙醇溶液定容至25mL刻度线,混匀静置10min。以试剂空白为参比液,用Alpha-1502紫外可见分光光度计测定吸光度值,绘制标准曲线,并得出回归方程。
浸提时间对玉米须中黄酮提取的影响
准确称取1.00g红叶石楠样品置于锥形瓶中,分别加入乙醇溶液20.0 mL作提取液,浓度为1.2.5.1实验选定的较佳乙醇浓度,塞上塞子,放入水浴锅中恒温水浴,温度为70℃,浸提时间分别为0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h,然后将浸提液过滤,洗涤,并定容于50mL容量瓶中,按1.2.4.6操作方法显色后,在最大吸收波长处检测其吸光度,平行实验三次,根据回归方程,计算提取液中黄酮的得率,得出较适宜的浸提时间。
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