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E1% 100实验七 维生素
E1% 100
一、实验目的
1 、掌握吸收系数法测定药物含量的方法。
2、熟悉紫外-可见分光光度计的原理及操作
二、实验原理
维生素 B1 结构中的嘧啶环为一芳香杂环，具有紫外吸收。因此可在其最大吸收波长处
测定吸光度，进行含量测定。
三、实验仪器和试剂：
1.仪器：
紫外-可见分光光度计、量瓶(100mL)、台秤、量筒(100mL)、烧杯、分析天平、漏斗、 铁架台、铁圈、滤纸、剪刀等。
2. 试剂：
维生素 B1 片、盐酸溶液(9—1000)
四、实验内容：
取本品 20 片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于维生素B125mg)，置 100ml 量瓶 中，加盐酸溶液(9→ 1000)约 70ml，振摇 15 分钟，使维生素 B1 溶解，加盐酸(9→ 1000) 稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一 100ml 量瓶中，再加盐 酸溶液(9→ 1000)稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在 246nm 处测定吸光度，
按 C12H17ClN4OS ·HCl 的吸收系数(E1% 1cm )为 421 计算，即得。
五、实验数据记录及处理
记录项目
记录项目
维生素 B1 质量 m/g
吸光度
吸收系数(E1%1cm )
维生素 B1 的标示量/%
维生素 B1 的标示量的平均值/%
相对标准偏差/%
A 1 一
V D W
标示量%= 1cm 100%
m S
六、注意事项
(一) 仪器的准备
1. 开启电源，使仪器预热 20 分钟。
2. 开机前，先确认仪器样品室是否有东西挡在光路上，以免影响仪器自检。
(二)仪器的操作步骤
1. 设置波长(246nm)。 2. 测定。 3. 数据记录与结果处理。
(三)将比色皿洗净装盒，关机
(四)填写仪器使用记录，
(五)维生素 B1的紫外吸收峰随溶液 pH 的变化而不同，因此要严格控制溶液的pH 值。
七、思考题
1.单色光不纯对于测得的吸收曲线有何影响？
2.利用邻组同学的实验结果， 比较同一溶液在相同仪器上测得的吸光度有无不同， 试做解释。
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