火腿中亚硝酸盐含量测定.docx

化学化工学院 2009 级本科科研训练项目实验报告 火腿中亚硝酸盐含量的测定 指导老师： 实验成员： 实验日期： 1 / 15 一、实验目的 1、 掌握分光光度法的原理和应用。 2、 了解亚硝酸盐的用途和危害。 3、 培养综合运用所学知识解决实际问题的能力。 4、 了解其他测亚硝酸盐含量的方法。 二、实验原理[1] 亚硝酸盐有护色、抑菌作用，常作为食品添加剂用于香肠、火腿等肉制品中。但若一次性食用 0.2 到 0.5 克就会出现中毒症状，是一种有毒致癌物质。根据 GB2760，肉制品中亚硝酸盐含量不得超过0.03g/kg，若过量会对身体产生危害，火腿是人们常吃的一种肉制品，因此对火腿中亚硝酸盐含量的检测十分必要。 目前我国环境和食品中亚硝酸盐检测的主要方法是光谱法和示 波极谱法。因光谱法所用仪器简单，灵敏度和准确度又比较高，所以应用较广。光谱检测方法主要有以下几种：1)发光法：包括化学发光法、荧光法；2)分光光度法：包括催化光度法、偶合光度法、流动注射光度法、共振散射光度法。 本实验采用的是偶合分光光度法。在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化，再与盐酸萘乙二胺偶合形成红色偶氮苯染料。通过测定红色偶氮苯染料的吸光光度可以确定亚硝酸盐的浓度。 先用草酸钠标定出高锰酸钾溶液的浓度，然后用高锰酸钾标定出 2 / 15 亚硝酸钠储备液的浓度，通过测定由储备液配制的亚硝酸钠标准溶液的吸光度作出亚硝酸钠的标准曲线。火腿样品经亚铁氰化钾溶液与乙酸锌溶液沉淀蛋白质，弃去溶液上层的油状脂肪液，过滤，通过测定滤液的吸光光度，与标准曲线进行比较测定出亚硝酸盐的含量。 三、仪器和药品 1、实验仪器 仪器名称 漏斗 型号 产地 规格 量筒 100mL，10mL 电热炉 容量瓶 50mL 吸量管 1mL，2mL 玻璃棒 漏斗架 洗耳球 胶头滴管 分析天平 电子天平 分光光度计 碱式滴定管 50mL 酸式滴定管 3 / 15 50mL 电热恒温水浴锅HH-6 电热恒温水浴锅 HH-6 国华电器有限公司 1000mL，500mL， 烧杯 250mL，50mL 2、实验药品 药品名称 药品名称 纯度 产地 批号 草酸钠 分析纯 乙酸锌 分析纯 浓盐酸 分析纯 亚硝酸钠 分析纯 高锰酸钾 分析纯 亚铁氰化钾 化学纯 盐酸萘乙二胺 分析纯 双汇王中王火腿 无水对氨基苯磺酸 分析纯 3、实验药品的配制 高锰酸钾溶液 称取高锰酸钾固体 9.18g 加水稀释到 1000mL， 盖上表面皿。加热至沸并保持微沸状态1h，冷却后，贮存于棕色试剂瓶中。将溶液在室温条件下静置 2-3 天后取其上清液使用； 4 / 15 稀硫酸（1+5) 量取一体积的浓硫酸加入五体积的蒸馏水中； 饱和硼砂溶液 称取 5g 硼砂溶于 100mL 热水中，冷却备用； 亚铁氰化钾溶液 称取 10.6g 亚铁氰化钾溶于水定容 100mL； 乙酸锌溶液 称取 11g 乙酸锌加 1.5mL 冰乙酸，溶于水定容 50ml； （6）20%盐酸 取 54mL 浓盐酸加水 45mL； （7）0.4%对氨基苯磺酸溶液 称取 0.4g 对氨基苯磺酸溶于 100mL 20%盐酸中； （8）0.2%盐酸萘乙二胺溶液 称取 0.2g 盐酸萘乙二胺溶于水定容 100ml； （9)10mg/mL 亚硝酸钠储备液 称取 5.3384g 用硅胶干燥 24h 小时 后的亚硝酸钠于 500mL 容量瓶中用蒸馏水定容； (10)5.0μg/mL 亚硝酸钠标准液 吸取亚硝酸钠储备液 0.5mL 于 1000mL 容量瓶中用蒸馏水定容。 四、实验步骤 1、高锰酸钾溶液的标定[2] 准确称取 0.40-0.50g 草酸钠基准物质三份，分别置于 250ml 锥形瓶中,加入 20ml 水和 37.5ml 稀硫酸，在水浴上加热到75-85℃,趁热用高锰酸钾溶液滴定。开始滴定时反应速率慢，待溶液中产生了Mn2+后，滴定速度可加快，直到溶液呈现微红色并保持半分钟内不褪色即为终点。 5 / 15 2、10mg/mL 亚硝酸钠储备液的标定[3] 用移液管移取 25mL10mg/mL 亚硝酸钠储备液三份，分别置于250ml 锥形瓶中，用装有已标定的高锰酸钾的酸式滴定管进行滴定， 滴定至溶液呈现微红色并保持半分钟内不褪色，即为滴定终点。 3、样品处理 分别称取三份 3g 左右火腿肠于 50mL 烧杯中,加入饱和硼砂溶液6.3mL,以玻棒搅匀,用 70℃左右的重蒸馏水约 100mL 将其洗入 250mL 的容量瓶中,置于沸水浴中加热 15 分钟,取出,一边转动一边加入 5mL 亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入 5mL 乙酸锌溶液以沉淀蛋白质，定容, 混匀,静置半小时,除去上层脂肪,过滤,弃去初滤液30mL,收集滤液备用。 4、标准曲线的绘制 吸取 0.00,0.20