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精选ppt 动物细胞融合 仙台病毒 丧失感染活性(不感染细胞) 保留融合活性(诱导细胞融合) 紫外线 物理法 化学法 生物法 融合过程示意图 单克隆抗体的概念 单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖 抗体: 化学性质单一、特异性强 实验目的:制备单克隆抗体. 实验原理:B淋巴细胞能产生抗体,骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖。 实验材料:小白鼠 实验器材:培养皿、针筒等等。 实验过程:如下页 根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的 实验方案: 单克隆抗体制备过程 单克隆抗体的应用 主要用于疾病的诊断、治疗和预防。与常规抗体相比,具有特异性强、灵敏度高的优点。如;各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细菌及血吸虫等数百种疾病的诊断;在疾病治疗方面,单克隆抗体犹如人体卫士,能识别“自己”与“异己”,一旦发现 致病因素便与之结合将其杀死。若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹”,将药物定向带到癌细胞所在部位,既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。 植物细胞工程与动物细胞工程的比较 植物细胞工程的技术手段主要有植物组织培养和植物体细胞杂交,其中植物组织培养是植物细胞工程的基础;动物细胞工程的技术手段主要有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植和核移植,其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。动、植物细胞工程的原理和技术手段有相似之点,但也存在不同之处,现对两者的主要技术手段加以分析比较: 一、植物细胞的组织培养与动物细胞培养1.过程 ⑴植物组织培养 再分化 激素、光 离体的植物器官、组织 或细胞 脱分化 营养物、激素 愈伤组织 根、芽 植物体 胚状体 人工种子 人造胚乳和种皮 发育 动物胚胎或幼龄动物器官、组织 ⑵动物细胞培养 剪碎、胰蛋白酶 单个细胞 动物血清、葡萄糖、氨 基酸、无机盐、维生素 细胞悬浮液 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 …… 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 动物细胞工程概述 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体制备应用 胚胎移植 核 移 植 2.2 动物细胞工程 单克隆抗体等 动物细胞工程常用的技术 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 是其他动物细胞工程技术的基础。 为什么要进行动物细胞培养? 1.动物细胞培养 如何进行细胞培养? 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 1.1概念 动物细胞培养和核移植技术 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 1、选材: 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,它们细胞增殖能力强,分裂旺盛,分化程度低,容易培养。 在进行动物细胞培养时,用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 2.分散成单个细胞 3.动物细胞生长特性: 细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上, 称为细胞贴壁。 要求: 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制: 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。 1.2 动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 细胞悬液 10代细胞 50细胞 剪碎 胰蛋白酶 洗涤、稀释、分离 原代培养 用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 比老龄动物的组织细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛。分化程度越低,繁殖能力越强,越容易培养。 动物细胞培养不能最终培养成生物体 细胞增殖缓慢,核型可能变化 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 贴壁生长 接触抑制 10代以内,保持正常二倍体核型 传代培养 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 原代培养和传代培养、细胞株和细胞系 多数组织细胞固定在表面生长和分裂。 随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 胰蛋白酶 剪碎 单个细胞 加培养液 制成 细胞悬浮液 细胞株 细胞系 细胞增值 无限传代 去掉组织间蛋白 动物细胞培养不能 最终培养成生物体 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境的知识,思考以下问题:
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