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- 2022-07-18 发布于四川
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首都师范大学生命科学学院实验报告
姓名 胡琪霞 刘畅 学号 成绩
课程名称 细胞学实验 时间 星期三 (上/下)上午
实验题目 离心技术与叶绿体和细胞核的密度梯度别离
【实验目的】
.以别离细胞核和叶绿体为例,掌握离心机的操作要点。
.了解两种不同的离心方法。
.通过光镜鉴定并别离细胞核和叶绿体。
【实验原理】
.用研钵研磨植物叶片可以使组织细胞在机械力的作用下破碎。而细胞器由于体 积较小短时间研磨下几乎不会被破坏。
.离心技术是根据颗粒在受到外向的离心力后而沉淀一种别离技术。可用于细胞 器的别离,别离的过程包括两个主要阶段:破碎细胞和细胞成分的别离。常用离心 技术一般包括差速离心法和密度梯度离心。两者的方法区别,应用范围等见下表。
差速离心法
密度梯度离心
方法原理
细胞中不同细胞器,大分子等 的沉降系数不同(也有局部细 胞器沉降系数之间有重叠部 分)。逐渐增加离心速度低、高 速交替进行离心,使沉降系数 不同的颗粒在不同的别离速度 及的离心时间下分批别离。
当不同颗粒存在浮力密度差时,在 密度梯度介质中,颗粒经过足够大 离心力和足够大时间后沉降或漂浮 到与自身密度恰好相等的位置,并 停留在这里到达平衡,形成一系列 密度区,从而将不同浮力密度的物 质得到别离。
应用范围
常用于从组织匀浆中别离各种 细胞器。
一般应用于别离大小相近,而密度 差异较大的细胞或细胞器。
例
细胞器的初步
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