实验一普通光学显微镜的使用 (2).pptVIP

NOR ５、人染色体NOR 第31页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 关于实验一普通光学显微镜的使用 (2) 第1页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 一、实验目的　 1、掌握普通光学显微镜的构造及原理 2、学习并掌握正确的使用方法 3、通过永久装片及新鲜切片观察，掌握一些细胞结构或细胞活动的特点 第2页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 二、实验内容 （一）显微镜的使用 （二）永久标本片的观察 （三）制作新鲜标本片 （四）作业 第3页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 （一）显微镜的使用 第4页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 显微镜是观察微小物体的精密仪器 第5页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 1、光学显微镜的组成 光学、照明、机械 2、显微镜的性能指标 3、显微镜的使用步骤 第6页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 显微镜的组成 第7页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 2、显微镜的性能指标 （1）分辨力 （2）放大率 第8页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 显微镜分辨能力的高低决定于光学系统的各种条件。被观察的物体必须放大率高，而且清晰，物体放大后，能否呈现清晰的细微结构，首先取决于物镜的性能，其次为目镜和聚光镜的性能。 第9页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 （1）分辨力 R 显微镜能分辨两物点间的最小距离。 R=0.61λ/NA 第10页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 数值孔径 NA 也叫做镜口率（或开口率），在物镜和聚光器上都标有它们的数值孔径，数值孔径是物镜和聚光器的主要参数，也是判断它们性能的最重要指标。 第11页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 数值孔径可用下式表示：NA=n·sinθ 式中： n—物镜与标本之间的介质折射率 θ—物镜的镜口角的1/2，即半孔径角。 镜口角是指从物镜光轴上的物点发出的光线与物镜前透镜有效直径的边缘所张的角度，见图。 第12页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 镜口角总是小于180°。因为空气的折射率为1，所以干燥物镜的数值孔径总是小于1，一般为0.05—0.95；油浸物镜如用香柏油（折射率为1.515）浸没，则数值孔径最大可接近1.5。虽然理论上数值孔径的极限等于所用浸没介质的折射率，但实际上从透镜的制造技术看，是不可能达到这一极限的。通常在实用范围内，高级油浸物镜的最大数值孔径是1.4。 几种物质的介质的折射率如下： 空气为1.0，水为1.33，玻璃为1.5，甘油为1.47，香柏油为1.52。 第13页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 可见光的波长为0.4—0.7微米，平均波长为0.55微米。若用数值孔为0.65的物镜，则R=0.61×0.55微米/0.65=0.52微米。这表示被检物体在0.52微米以上时可被观察到，若小于0.52微米就不能视见。如果使用数值孔径为1.25的物镜，则R=0.27微米。凡被检物体长度大于这个数值，均能视见。 紫外线作光源的显微镜和电子显微镜就是利用短光波来提高分辨力以检视较小的物体的。 物镜分辨力的高低与造象是否清楚有密切的关系。目镜没有这种性能。目镜只放大物镜所造的象。 第14页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 可通过： ①__________；　　　 ②_______________； ③________________来提高分辨力。 减低波长　 增大折射率 加大镜口角 R值愈_______，分辨力愈高，物象愈清楚。 小 练 习 第15页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 （2）放大率 显微镜的放大率（V）等于物镜放大率（V1）和目镜放大率（V2）的乘积，即： V=V1×V2 第16页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 安放 对光 调焦 观察 放片 3、显微镜的使用步骤 对光：以视野明亮均匀为宜。 调焦：先在低倍镜下，以粗准焦螺旋调，再以细准焦螺旋调。看清楚物象后再 转至高倍镜下，调细准焦螺旋。注意：高倍镜不要使用粗准焦螺旋调焦。 第17页，共43页，2022年，5月20日，0点52分，星期四 （二）永久标本片的观察 胞间连丝 有丝分裂 血细胞 肝细胞 人染色体ＮＯＲ 草履虫 人口粘膜上皮细胞 植物