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2023新课标版生物高考第二轮复习
第十单元 现代生物科技专题
专题28 基因工程与蛋白质工程
1.肿瘤已成为严重危害人类健康的高发病,主要的治疗手段有化疗、放疗和手术等,而肿瘤细胞对肿瘤药物产生耐药性是化疗失败的主要原因之一,研究表明肿瘤细胞耐药性的产生与过量表达的跨膜转运蛋白BCRP有关,研究人员尝试建立稳定表达BCRP的细胞系。回答下列问题:
(1)研究人员从人的 (填“普通体细胞”或“癌细胞”)中提取出总RNA,逆转录后进行PCR扩增获得大量BCRP基因。?
(2)随后构建BCRP基因的真核表达载体,研究人员选择了P质粒作为载体,因为其具有①能被真核细胞识别的启动子,作用是 ;②抗新霉素的标记基因;③多个限制酶切割位点,作用是 。?
(3)在不破坏表达载体各功能序列的基础上,对上述环状载体进行酶切得到线性化载体,随后将其导入受体细胞,线性化载体可整合到染色体DNA上。联系所学知识推测进行酶切得到线性化载体的原因是? 。?
答案 (1)癌细胞 (2)①RNA聚合酶识别和结合的位点 ③便于插入外源基因 (3)与环状载体相比,线性化载体能更稳定地存在并发挥功能
解析 (1)分析题意可知,肿瘤细胞耐药性的产生与过量表达的跨膜转运蛋白BCRP有关,故为获取BCRP基因,需要从癌细胞中提取出总RNA,逆转录后进行PCR扩增。(2)启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点,用于驱动基因的转录过程;载体中有多个限制酶切割位点的作用是便于插入外源基因。(3)与环状载体相比,线性化载体能更稳定地存在并发挥功能,故需要酶切得到线性化载体。
2.如图所示为RT-PCR(逆转录-荧光PCR技术)的原理:PCR过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和淬灭基团(抑制荧光发出),当酶催化子链延伸至探针处时会水解探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。
请回答下列问题:
(1)PCR技术的目的是 。RT-PCR过程中,需先将RNA逆转录成cDNA,故装置中需添加的酶有 。?
(2)对新冠病毒进行检测时,探针的设计依据是 。探针与模板结合发生在PCR循环中的 (选填“变性”“复性”或“延伸”)阶段。?
(3)若监测系统检测到荧光信号,则可判定该检测样本为阳性,其原理是?? 。?
(4)为了在没有核酸检测的条件下及早发现新冠病毒,我国于2022年3月11日推出新冠病毒抗原检测试剂盒作为核酸检测的补充措施,该试剂盒的检测原理是 。?
答案 (1)大量扩增目的基因片段,用于检测 逆转录酶 (2)一段已知目的基因的核苷酸序列 复性 (3)样本中的新冠病毒核酸会被探针识别,从而进行快速复制,导致监测系统检测到荧光信号 (4)抗原与抗体的特异性结合
解析 (1)PCR技术的目的是大量扩增目的基因片段,用于基因工程或检测。以RNA为模板逆转录成cDNA,是逆转录过程,需要用到逆转录酶。(2)探针是可以与模板结合的一小段DNA序列,故设计的依据是一段已知目的基因的核苷酸序列,变性过程是DNA双链打开的过程,复性时,引物与探针结合到模板DNA上。(3)根据题意,当酶催化子链延伸至探针处时会水解探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。因此,样本中有新冠病毒核酸时,能进行快速复制,导致监测系统检测到荧光信号。(4)新冠病毒抗原检测试剂盒的检测原理是抗原与抗体的特异性结合。
3.我国科学家黄三文团队通过基因编辑技术培育出二倍体自交系和杂交优势显著的杂交马铃薯品系“优薯1号”,突破了百年来马铃薯自交不亲和,薯块只能无性繁殖的难题。如图是科学家用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点敲除二倍体马铃薯的自交不亲和基因的示意图。
(1)据图分析CRISPR/Cas9基因编辑技术能对基因进行定点编辑,其原理是由一条单链向导RNA引导Cas9蛋白到 进行切割。已知CRISPR/Cas9仅存在于原核生物中,故需借助 技术才能在马铃薯细胞中发挥作用。Cas9蛋白和向导RNA结合形成的复合物能切割DNA,从功能上来看该复合物相当于基因工程中的限制酶,CRISPR/Cas9打破了限制酶 的局限性。所以在使用CRISPR/Cas9系统对不同基因进行编辑时,应使用 (填“相同”或“不同”)的向导RNA。?
(2)敲除二倍体马铃薯的自交不亲和基因后可让该植株自交观察是否产生种子来检测其作用效果
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