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1
专题1 基因工程
基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第1页
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2
1DNA重组技术的基本工具
第1节
安徽省含山中学 王冰
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第2页
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3
问题探讨
手术刀
缝合针
运输工具
培育抗虫棉需要哪些基本工具?
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第3页
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4
来源
种类
作用
作用结果
阅读课本4-5页“限制性核酸内切酶——分子手术刀”的相关内容,填写下表
自主学习
主要从原核生物中分离纯化而来
已经分离出大约4000种
1、识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列
2、使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
形成两种末端:黏性末端或平末端
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第4页
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5
脱氧核苷酸的结构
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第5页
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6
A
3’,5’-磷酸二酯键
3’端
5’端
3’端
5’端
磷酸二酯键
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第6页
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7
仔细观察各限制酶 识别的特定序列有何 特点?
限制酶的识别序列
限制酶所识别的序列的特点是:呈现碱基互补对称,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中心轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的 ,称为回文序列
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第7页
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8
中轴线
在G与A之间切割
大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)只能识别GAATTC
序列,并在G和A之间切开。
EcoRI限制酶的作用
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第8页
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9
黏性末端
黏性末端
EcoRI限制酶的切割
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第9页
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10
SmaI只能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切开。
中轴线
SmaI限制酶的作用
在G与C之间切割
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第10页
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平末端 平末端
SmaI限制酶的切割
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第11页
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12
你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗?
原核生物易受自然界外源DNA的入侵,但生物
在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机
制,以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细
菌的一种防御性工具,当外源DNA侵入时,会
利用限制酶将外源DNA切割掉,以保证自身的
安全。所以,限制酶在原核生物中主要起到切
割外源DNA、使之失效,从而达到保护自身的
目的。
寻根问底
为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA?
通过长期的进化,细菌中含有某种限制酶的细胞,其DNA分子中不具备这种限制酶的识别切割序列,或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开。这样,尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断,并且可以防止外源DNA的入侵。
作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKABGDRQZ — HZZWHWGFX — Z101731135 这是第12页
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类型
来源
功能
相同点
差别
E·coliDNA连接酶
T4DNA连接酶
大肠杆菌
T4噬菌体
恢复磷
酸二酯
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