蛋白质分离纯化.pptxVIP

;蛋白质的分离纯化;样品的前处理;蛋白质的分离方法;根据蛋白质的溶解度差异分离 —沉淀技术 可逆沉淀： 等电点沉淀、盐析法、有机溶剂沉淀 不可逆沉淀： 热变性沉淀、重金属盐沉淀、有机酸沉淀;1、根据溶解度不同;（2）等电点沉淀法1）pH 偏离pI时，蛋白质带相同符号的净电荷而互相排斥→蛋白质溶解度大。2）pH = pI时，蛋白质的净电荷为0→蛋白质聚集沉淀3）等电点沉淀法的缺点：沉淀不完全。 ;2、根据分子大小不同;透析——只用于除盐类和小分子杂质;透析——只用于除盐类和小分子杂质;2）超滤（ultrafiltration）：是利用压力和离心力，借助于超滤膜将不同分子量的物质分离的技术。Ultrafiltration的功能：纯化和浓缩（同PEG，聚乙二醇）。Ultrafiltration膜：丙烯氰、醋酸纤维素、硝酸纤维素和尼龙等。;超过滤——除小分子杂质，分离、浓缩蛋白质;（2）凝胶层析;原理： 1、分子量大的物质不能进入凝胶粒子内部，随洗脱液从凝胶粒子之间的空隙挤落下来，所以大分子物质迁移速度快； 2、小分子物质要通过凝胶网孔进入凝胶粒子内部，所以小分子物质迁移速度慢。;作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CKKPOYLZI — HGKKJHGPE — 这是第15页;作者: 眼猿(笔名) 文档编