化学发光技术; ?概念:某些化合物分子吸收化学能后,被激发到激发态,再由激发态返回至基态时,以光量子的形式释放出能量,这种化学反应称为化学发光反应,利用测量化学发光强度对物质进行分析测定的方法称为化学发光分析法。;化学发光反应两个关键步骤:化学激发和发光。
故化学反应要成为发光反应,必须满足两个条件:
1.反应必须提供足够的能量( 170 ~ 300KJ / mol );
2. 这些化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发态,并且有足够的光量子产率。
发光效率:指发光剂在反应中的发光分子数与参
加反应的分子数之比。一般化学发光反应,值约
为 10 - 6
;
常见化学发光剂
直接:吖啶酯类 三联吡啶钌
间接:酶促化学发光剂
(辣根过氧化物酶---鲁米诺及其衍生物,
碱性磷酸酶----AMPPD)
酞箐,二甲基噻吩衍生物等(活性氧)
?
;5;条件: 碱性PH8.6
催化剂: 辣根过氧化物酶,氧化血红素等
氧化剂:过氧化氢,高锰酸钾,碘等
量子产率:0.05----0.15
应用: 检测血迹;470nm;三联吡啶钌Ru(byp)3+2
电化学发光剂
;发光剂的常见标记技术
1.碳二亚胺缩合反应(酰胺键)
2.重氮盐偶联法
3.过碘酸钠氧化法
;化学发光免疫分析技术
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