基因工程-第五章-克隆重组体的构建、转化PPT课件.ppt

2022-7-29 苏州科技学院生物系 叶亚新 第五章 克隆重组体的构建、转化 第一节 受体细胞 受体细胞（receptor cell）或称宿主细胞（host cell）：能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞。 选择受体细胞的基本原则 便于重组DNA分子的导入 能使重组DNA分子稳定存在于细胞 便于重组子的筛选 遗传稳定性高，易于扩大培养或发酵生长 安全性高，无致病性 内源蛋白水解酶基因缺失或蛋白酶含量最低 在遗传密码的应用上无明显偏倚性 有较好的转译后加工机制，便于真核目的基因的高效分泌表达 2022-7-29 苏州科技学院生物系 叶亚新 第五章 克隆重组体的构建、转化 第一节 受体细胞 受体细胞的选择 限制缺陷型 大肠杆菌的限制系统主要由hsd R基因编码，因此具有hsd R—遗传表型的 大肠杆菌各株均丧失了降解外源DNA的能力，同时大大增加了外源DNA的可转化性。 重组缺陷型 大肠杆菌中存在着两条体 内同源重组的途径，即RecBCD途径和RecEF途径，前者远比后者重要，但两种途径均需要 RecA重组蛋白的参与。因此受体细胞必须选择体内同源重组缺陷型的遗传表型，其相应的基因 型为recA-、recB-、recC-. 遗传互补型 感染寄生缺陷型 2022-7-29 苏州科技学院生物系 叶亚新 第五章 克隆重组体的