干细胞及成体细胞.pptxVIP

;;第一节 概 述;干细胞（stem cell）是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的未分化或低分化原始细胞群体，也称为“万能细胞”。 通常呈圆形或椭圆形，细胞体积小，核相对较大，细胞核多为常染色质，并具有较高的端粒酶活性，不同干细胞有各异的蛋白质标志分子，可作为确定干细胞位置、分离提纯干细胞的标志。 ;二、干细胞的增殖特征;干细胞的分裂方式;（一）按其分化潜能的大小，干细胞可分为三类：一是全能干细胞，二是多能干细胞，三是单能干细胞。 ;（3）单能干细胞（multipotent stem cell ） 也叫专能、偏能干细胞，指除了自我复制外，只能分化为一种类型子代类型的一类细胞。如肌肉中的成肌细胞等。;;;（二）根据干细胞的来源，可分为胚胎干细胞、成体干细胞、其他诱导多能干细胞。 （1）来源于胚胎—— 胚胎干细胞ESC（Embryonic Stem Cell ） 指来源于哺乳类动物胚胎发育早起囊胚期内细胞团细胞，在体外培养条件下，具有体外无限复制和分化为体内任何种类细胞的潜能。如：ES细胞、EG细胞、EC细胞等。 ;（2）来源于成体—— 成体组织来源的干细胞 ASC（Adult Stem Cell ） 是指那些分布在成体组织中尚未分化的、具有自我更新、并负有构建和补充某种组织的各种类型细胞潜能的干细胞，又称为组织特异性干细胞（Tissue-specific stem cell）。 它们主要用于维持细胞功能的稳定，具有修复和再生能力，能够产生新的干细胞，或者能按一定的程序分化，形成新的功能细胞，使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡。如：神经干细胞，表皮干细胞。;（3）诱导性多能干细胞（ induced pluripotent stem cell ，iPSC） 来源于终末分化的体细胞，通过重编程，逆向转变为多能的干细胞。;;第二节 成体干细胞的分离培养;一、成体干细胞的来源;第17页/共43页;成体干细胞的优点： （1）获取相对容易； （2）源于患者自身的成体干细胞在应用时不存在组织性相容的问题，避免了移植排斥反应和使用免疫抑制剂； （3）胚胎干细胞分化具有“非定位性”，目前，尚不能控制胚胎干细胞在特定部位分化成相应的细胞，容易导致畸胎瘤。理论上，成体干细胞致瘤风险低，所受伦理学争议较少； （4）成体干细胞也具有类胚胎干细胞的多向分化潜能。;造血干细胞（Hematopoietic Stem Cells，HSC）指具有自我更新能力和多向分化潜能的最原始的造血细胞。 造血干细胞的来源：骨髓、外周血、脐带血、胎儿造血系统。 ;不同来源造血干细胞的比较： 　;第21页/共43页;造血干细胞的表面标志;根据造血干细胞的表面标志，可通过免疫细胞化学、流式细胞仪、分子杂交和PCR等多种细胞生物学和分子生物学手段来检测造血干细胞。现大多仍然基于对CD34+细胞的富集来筛选造血干细胞。 方法：密度梯度离心、拒染和抗原标志物进行密度梯度离心、流式细胞分选、免疫磁珠分离、平面黏附分离等 ;（1）流式细胞分选;第25页/共43页;第26页/共43页;（2）免疫磁珠分离;第28页/共43页;免疫磁珠法分为阳性分离法和阴性分离法： 阳性分离法－磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞 阴性分离法－磁珠结合不需要的细胞，游离于磁场的细胞为所需细胞 一般而言，阴性分离法的磁珠用量比阳性分离法的大，阳性分离法用行更多。;造血干细胞的检测方法;二、间充质干细胞;分化潜能;16;;（二）密度梯度离心法 利用不同颗粒之间存在沉降系数差时，在一定离心力作用下，颗粒各自以一定速度沉降，在密度梯度不同区域上形成区带的方法。 ;MSC的应用;第三节 干细胞的应用研究;一、移植研究—恢复器官功能 ;2．基因治疗。即通过胚胎干细胞和基因工程技术，矫正缺陷基因。 因干细胞能自我复制更新，是基因治疗的理想靶细胞。将治疗基因整合到干细胞，再将干细胞移植入人体中，能够持久地发挥作用，而不担心像分化的细胞那样，在细胞更新中可能丢失治疗基因的结果。 ;二、基础研究 ;三、癌症治疗 ;Thank You !;感谢您的观看！