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2022年基因组文库和cDNA文库的比较 作者 : 眼猿(笔名) 2022年基因组文库和cDNA文库的比较 作者 : 眼猿(笔名) 01 基因组文库 02 cDNA文库 03 两者比较 作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CQKUSAPFI — HLAAYHHGT — Z537104855 这是第2页 01基因组文库02cDNA文库03两者比较 基因组文库 概念 文库构建（原核） 文库构建（真核） 作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CQKUSAPFI — HLAAYHHGT — Z537104855 这是第3页 基因组文库概念文库构建（原核）文库构建（真核） 01 概念 基因组文库：某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌的群体中，这个受体菌群体就是该种生物的基因组文库。 公式:N=ln（1-P）/ln（1-f）, 实际克隆子数应为2N~3N或更大。 作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CQKUSAPFI — HLAAYHHGT — Z537104855 这是第4页 01概念基因组文库：某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌的群体中，这个受体菌群体就是该种生物的基因组文库。公式:N=ln（1-P）/ln（1-f）,实际克隆子数应为2N~3N或更大。 01 文库构建（原核） 物理学方法：机械类或超声波等 生物化学方法：限制酶部分切割 制备基因组DNA并片段化 重组DNA导入受体菌细胞并扩增 DNA片段与载体重组连接 筛选鉴定基因组文库 原核生物基因组较小，一般采用质粒载体或λ载体。 作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CQKUSAPFI — HLAAYHHGT — Z537104855 这是第5页 01文库构建（原核）物理学方法：机械类或超声波等生物化学方法：限制酶部分切割制备基因组DNA并片段化重组DNA导入受体菌细胞并扩增DNA片段与载体重组连接筛选鉴定基因组文库原核生物基因组较小，一般采用质粒载体或λ载体。 01 文库构建（真核） a.构建 λ噬菌体型基因组文库 真核生物和原核生物基因组文库构建的原理和过程基本相似，方法有异（原核采用质粒载体或λ载体）。下面介绍三种方法： 作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CQKUSAPFI — HLAAYHHGT — Z537104855 这是第6页 01文库构建（真核）a.构建 λ噬菌体型基因组文库真核生物和原核生物基因组文库构建的原理和过程基本相似，方法有异（原核采用质粒载体或λ载体）。下面介绍三种方法： 01 文库构建（真核） b.构建 Cosmid基因组文库 由于筛选困难、重组效率低、文库不易贮存，Cosmid使用不如λ噬菌体载体普遍。 作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CQKUSAPFI — HLAAYHHGT — Z537104855 这是第7页 01文库构建（真核）b.构建 Cosmid基因组文库由于筛选困难、重组效率低、文库不易贮存，Cosmid使用不如λ噬菌体载体普遍。 01 文库构建（真核） c.构建酵母人工染色体型基因组文库 酵母人工染色体 作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CQKUSAPFI — HLAAYHHGT — Z537104855 这是第8页 01文库构建（真核）c.构建酵母人工染色体型基因组文库酵母人工染色体 基因组文库 概念 文库制备 作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CQKUSAPFI — HLAAYHHGT — Z537104855 这是第9页 基因组文库概念文库制备 02 概念 cDNA文库：以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。 公式:N=ln（1-P）/ln（1-f） 作者: 眼猿(笔名) 文档编码:CQKUSAPFI — HLAAYHHGT — Z537104855 这是第10页 02概念cDNA文库：以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。公式:N=ln（1-P）/ln（1-f） 02 文库构建 细胞总RNA的制备及mRNA的分离 包括mRNA、tRNA、rRNA cDNA第一条链的合成 oligo引导合成法、随机引物引导合成法 双